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申请/专利权人:武汉生物工程学院;江畔(武汉)农业科技发展有限公司
摘要:本发明公开了一种景天科多肉植物通用的组织培养方法,属于通过组织培养技术的植物再生技术领域。本方法利用叶片作为外植体进行组培快繁,在切口处诱导生长得到体细胞胚,建立了高效的体细胞胚发生途径植株再生体系,体细胞胚诱导率高,植株的再生效率明显提高,有效解决了现有技术中花茎、花萼等外植体的获取受季节以及苗龄等因素限制的问题。该方法不受季节限制,可源源不断生成新的叶片组织,外植体的获取非常容易,极大缩短了时间成本,可实现品种稀有的景天科多肉植物大规模的可持续的工厂化种苗生产。
主权项:1.一种景天科多肉植物通用的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、外植体获取:景天科多肉植物的母体在适宜环境下进行培养使其生长新叶;沿新叶生长点收取叶片,叶片消毒后垂直于叶片纵轴进行横切以形成切口平整的叶片片段,得到外植体;景天科多肉植物为梦幻喷泉(Echeveria'FantasticFountain')、玫瑰女王(Echeveria'Queen'sRose')、华雪;其中,华雪是以华丽风车(Graptopetalumpentandrumsubsp.superbumKimnach)为父本和雪莲(Echeverialaui)为母本培育的杂交品种;培养的方式为无土基质栽培;无土基质以泥炭土和珍珠岩以质量比2~5:1配制而成;培养的环境如下:在15~25℃,每日12~16h光照强度1000~2500lx的环境下进行培养,并每周定时浇灌杀菌药液1次;新叶的长度为0.5~3.0cm;叶片片段的长度为0.5~1.0cm;S2、体细胞胚诱导:外植体垂直放置于诱导培养基表面,使其切口与表面贴合,随后置于黑暗的适宜环境下进行培养,于切口处诱导生长得到体细胞胚;诱导培养基为添加了1.0~3.0mgL6-苄氨基嘌呤、0.1~1.0mgL萘乙酸、20~30gL蔗糖、0.5~2gL活性炭的MS培养基,pH=5.8~6.2;培养的环境如下:在23~25℃培养2~5周;S3、植株再生:将体细胞胚转移至再生培养基中,在适宜环境下进行培养,使体细胞胚萌发形成完整植株;再生培养基为添加了1.0~2.5mgL6-苄氨基嘌呤、0.5~2.0mgL激动素,0.1~0.5mgL萘乙酸、20~30gL蔗糖、0.5~2.0gL活性炭的MS培养基,pH5.8~6.0;培养的环境如下:在23~25℃,每日12~16h光照强度1000~2500lx的环境下培养4~8周。
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