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基于GC-MS检测动物肠道食糜或粪便中吲哚的方法 

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申请/专利权人:临沂大学

摘要:本发明属于肠道检测技术领域,具体为基于GC‑MS检测动物肠道食糜或粪便中吲哚的方法,包括三个步骤,步骤一,提取物测定前准备;按比例配置标准工作溶液,采集粪便或血清,配置乙醇、乙酸酐、水混合的提取液;步骤二,提取物测定;采用GC‑MS气相色谱质谱对溶液进行检测;步骤三,测定优化;本申请可以通过检测动物肠道食糜或粪便中吲哚的状态,给后续调节动物体健康状态提供理论依据,能够最大程度从肠道和粪便中提取出吲哚含量,同时有效避免肠道和粪便中其他物质造成干扰,为后续检测提供良好的基础,进而实现肠道和粪便中吲哚的定性和定量检测;有效避免肠道和粪便中其他物质造成干扰,能实现吲哚的大规模定量检测,非常的高效。

主权项:1.基于GC-MS检测动物肠道食糜或粪便中吲哚的方法,其特征在于,包括三个步骤,步骤一,提取物测定前准备;按比例配置标准工作溶液,采集粪便或血清,配置乙醇、乙酸酐、水混合的提取液;将提取液加入粪便或血清样品中进行萃取,向粪便或血清样品中加入标准工作溶液,再加入提取液进行超声萃取,而后放入离心管内提取清液,而后在清夜内加入提取液,得到萃取液;取800ul-900ul萃取液对过已活化的OasisHLB固相萃取小柱进行净化和富集,收集洗脱液进行测定;步骤二,提取物测定;采用GC-MS气相色谱质谱对溶液进行检测;色谱柱:ACQUITYBEHC18,流动相A为0.1%有机胺酯TPP,B为乙腈;洗脱程序为:0~0.5min,10%B;0.5~2.0min,10%~95%B;2~3min,95%B;3~3.5min,95%~10%B;3.5~5min,10%B;色谱柱的规格:2.1×50mm,1.7μm;进样量1-3μL;流速1.50mLmin;质谱检测条件为:电喷雾离子源,正离子扫描ESI+,多反应监测MRM模式,DB-5MS毛细管柱,毛细管柱电压:2.5kV;EI轰击源:70ev;色谱-质谱连接口温度:300℃;四极杆温度:230℃;离子源温度:150℃;步骤三,测定优化;色谱柱的柱温采取程序升温,50~60℃保持4~11分钟,优选50℃保持4分钟;再以每十分钟35℃的速率升温至300℃,保持6分钟,优选以十每分钟30℃的速率升温至300℃,保持5分钟。

全文数据:

权利要求:

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