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申请/专利权人：浙江农林大学
摘要：本发明提供了一种农杆菌介导的常绿蓝莓转基因体系的建立方法，包括：将含有功能基因的发根农杆菌加入至液体培养基中，制备得到侵染液；真空渗透处理的方法为：将外植体放入侵染液中进行真空渗透处理后，置于共培养培养基上进行共培养；以无菌条件下生长的常绿蓝莓苗的嫩芽作为外植体，将外植体放入侵染液中进行真空渗透处理后，置于共培养培养基上进行共培养；再将共培养后的外植体洗菌后，放置于再生培养基上进行再生培养；再生培养15d~20d后，外植体陆续长出转基因愈伤组织，并出现芽点，最终得到常绿蓝莓转基因体系。本发明首次实现了常绿蓝莓愈伤组织的转基因，并获得了转基因芽，转化率达3.27%，仅需要2‑3个月就能获得转基因芽。
主权项：1.一种农杆菌介导的常绿蓝莓转基因体系的建立方法，其特征在于，包括：（1）将含有功能基因的发根农杆菌加入至液体培养基中，制备得到侵染液；所述液体培养基的配方为：WPM+2%蔗糖+0.1mgLIBA+0.4mgLCppu+20mgL乙酰丁香酮，pH=5.2±0.02；（2）以无菌条件下生长的常绿蓝莓苗的嫩芽作为外植体，将外植体放入侵染液中进行真空渗透处理后，置于共培养培养基上进行共培养；所述共培养培养基的配方为：WPM+2%蔗糖+8.5gL琼脂+0.05mgLIBA+0.2mgLCppu+20mgL乙酰丁香酮，pH=5.2±0.02；（3）再将共培养后的外植体洗菌后，放置于再生培养基上进行再生培养；再生培养15d~20d后，外植体陆续长出转基因愈伤组织，并出现芽点；所述再生培养基的配方为：WPM+2%蔗糖+8.5gL琼脂+0.05mgLIBA+0.2mgLCppu+300mgLCarb+100mgLTim，pH=5.2±0.02；（4）每隔14~16d更换一次再生培养基，进行继代培养，实验进行45d~60d后，外植体上长出成簇转基因芽，得到常绿蓝莓转基因体系。
全文数据：
权利要求：
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