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申请/专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
摘要：本发明公开了细菌中水平转移基因激活介导的基因串联重复的诱导方法。本发明公开的方法包括：将抗性基因表达盒分为上游部分与下游部分，依次连接下游部分、目的DNA与上游部分，得到重组DNA片段；将重组DNA片段导入细胞中，得到重组细胞；在含有抗性基因对应的抗性物质的培养体系中培养重组细胞，筛选即得到发生基因串联重复的重组细胞。实验证明，本发明的方法可以增加细胞中目的DNA拷贝数，无论对于质粒DNA还是基因组DNA序列，都可对其快速诱导出多拷贝串联重复，且本发明的方法不受细胞种类的限制，在生物细胞中应用具有广泛性。
主权项：1.增加细胞中目的DNA拷贝数的方法，包括：1）将抗性基因表达盒分为上游部分与下游部分，依次连接所述下游部分、目的DNA与所述上游部分，得到重组DNA片段；a1）所述下游部分的核苷酸序列如序列表中序列1的第422-922位所示，所述上游部分的核苷酸序列如序列表中序列1的第1901-1988位所示；或，a2）所述下游部分的核苷酸序列如序列表中序列2的第551-1051位所示，所述上游部分的核苷酸序列如序列表中序列2的第2036-2184位所示；或，a3）所述下游部分的核苷酸序列如序列表中序列3的第3262-3682位所示，所述上游部分的核苷酸序列如序列表中序列3的第4839-4890位所示；2）将所述重组DNA片段导入细胞中，得到重组细胞；3）在含有所述抗性基因对应的抗性物质的培养体系中培养所述重组细胞，筛选得到所述目的DNA拷贝数增加的重组细胞，实现细胞中目的DNA拷贝数的增加；所述细胞为大肠杆菌或枯草芽孢杆菌细胞；所述抗性物质为抗生素。
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百度查询： 中国科学院天津工业生物技术研究所 细菌中水平转移基因激活介导的基因串联重复的诱导方法
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