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申请/专利权人:中国科学院深圳先进技术研究院
摘要:本发明公开了一种稳定表达外源基因的辛德毕斯病毒载体及其制备方法和应用。利用所述的辛德毕斯病毒载体转染细胞成功制备出携带绿色荧光蛋白基因的SINV感染性病毒颗粒。该感染性病毒颗粒经过体外多轮筛选获得适应性突变,在体外可感染多种细胞,感染后可复制增殖,并能提高外源插入基因的稳定性,在鼠脑神经环路可顺向跨多级突触传播,在脑神经环路标记及示踪、非人灵长类神经细胞的标记、药物筛选平台的建立、药物抑制病毒作用机制、病毒疫苗和诊断试剂的研发、动物模型的建立、病毒复制和致病机制的分析等方面具有广泛的应用价值。
主权项:1.一种稳定表达外源基因的辛德毕斯病毒载体,其特征在于,所述辛德毕斯病毒载体以pSINV为骨架载体,在所述骨架载体上连接有荧光蛋白基因EGFP和点突变的NSP1基因;所述辛德毕斯病毒载体上依次连接有UBC启动子的核苷酸序列、5’UTR、NSP1基因的核苷酸序列、NSP2基因的核苷酸序列、NSP3基因的核苷酸序列、NSP4基因的核苷酸序列、C基因的核苷酸序列、E3基因的核苷酸序列、E2基因的核苷酸序列、6K基因的核苷酸序列、E1基因的核苷酸序列、EGFP基因的核苷酸序列、3’UTR;所述UBC启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示;所述5’UTR的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示;所述NSP1基因的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示;所述NSP2基因的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示;所述NSP3基因的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示;所述NSP4基因的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示;所述C基因的核苷酸序列如SEQIDNO.11所示;所述E3基因的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示;所述E2基因的核苷酸序列如SEQIDNO.13所示;所述6K基因的核苷酸序列如SEQIDNO.14所示;所述E1基因的核苷酸序列如SEQIDNO.15所示;所述荧光蛋白基因EGFP的核苷酸序列如SEQIDNO.16所示;所述3’UTR的核苷酸序列如SEQIDNO.17所示。
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