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摘要：本发明属于检测技术领域，特别涉及一种ND‑EESI‑MS实时检测抗菌金纳米颗粒与细菌相互作用的方法，包括：制备抗菌金纳米颗粒，并测定抗菌金纳米颗粒对待测细菌的最低抑菌浓度，向待测细菌菌液中加入或不加入抗菌金纳米颗粒，培养、离心收集上清液，得到待测样品和对照样品，中性解吸电喷雾萃取电离质谱检测，分析待测样品相对于对照样品中含量显著减少的差异代谢物，向含抗菌金纳米颗粒的待测细菌菌液中补充差异代谢物，验证差异代谢物是否为抗菌金纳米颗粒的关键抗菌靶标。本发明通过检测抗菌金纳米颗粒与细菌动态相互作用下细菌代谢物的改变，探究纳米材料抗菌的分子机制，为筛选抗菌剂并指导新药的研发奠定基础。
主权项：1.一种ND-EESI-MS实时检测抗菌金纳米颗粒与细菌相互作用的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备抗菌金纳米颗粒，并测定所述抗菌金纳米颗粒对待测细菌的最低抑菌浓度；S2、制备待测细菌菌液；S3、向待测细菌菌液中加入所述抗菌金纳米颗粒，培养3-4h，离心收集上清液，得到待测样品，菌液中所述抗菌金纳米颗粒的浓度≥所述最低抑菌浓度；将未经抗菌金纳米颗粒处理的待测细菌菌液离心，收集上清液，得到对照样品；对所述待测样品和对照样品进行中性解吸电喷雾萃取电离质谱检测；S4、中性解吸电喷雾萃取电离质谱检测：设置中性解吸电喷雾萃取电离质谱的离子源为正离子模式，各个参数如下：离子源以甲醇为萃取剂，萃取剂通过石英毛细管，使用N2作为喷雾气流；在进样针的钢针部位施加2-5kV正高压，在电场的作用下，样品前端产生承载待测物的带电液滴，带电液滴去溶剂化后得到气态待测物离子，引入到质谱仪中进行检测；碰撞诱导解离实验时，母离子隔离宽度为1.6-2.0Da，碰撞能量为20％-40％，其他条件为系统自动优化；S5、定量分析待测样品相对于对照样品中的差异代谢物，通过向含所述抗菌金纳米颗粒的待测细菌菌液中补充所述差异代谢物，验证所述差异代谢物是否为所述抗菌金纳米颗粒的关键抗菌靶标。
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百度查询： 江西中医药大学 一种ND-EESI-MS实时检测抗菌金纳米颗粒与细菌相互作用的方法
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