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申请/专利权人：植恩生物技术股份有限公司
摘要：本发明公开了测定人血浆中氨氯地平、贝那普利及贝那普利拉含量的方法。本发明以氨氯地平‑d4、贝那普利‑d5、贝那普利拉‑d5为内标，主要经液液萃取提取氨氯地平、经蛋白沉淀提取贝那普利及贝那普利拉，通过反相色谱系统洗脱分离，用质谱仪检测器检测，氨氯地平、贝那普利及贝那普利拉线性范围分别为0.030~9.00ngml、0.500~250ngml和1.00~500ngml。本发明建立了一种高效、灵敏度高、线性范围宽、无残留、准确、稳健的定量方法，可有力支持氨氯地平贝那普利复方制剂以药动学为终点的生物等效性评价。
主权项：1.测定血浆中氨氯地平、贝那普利及贝那普利拉含量的方法，其包括如下步骤：1）样品处理：冰水浴条件下，取含有抗凝剂的血浆样品，加入同位素内标工作溶液，混匀，加入pH调节剂；再加入萃取剂，混匀；离心后冷冻，分离上清液加入长玻璃试管；吹干上清液样品；取含有抗凝剂的血浆样品，加入同位素内标工作溶液，混匀，加入沉淀剂，混匀；离心后取上清液加入吹干的长玻璃试管，加入稀释剂，混匀；2）样品分离：步骤1）处理后的样品经液相色谱系统分离；色谱条件：反相窄径色谱柱，含酸的水溶液为流动相A，甲醇-乙腈溶液为流动相B，强洗针液为含酸的有机相-水相的混合溶液，弱洗针液为有机溶液或有机相-水相的混合溶液；3）样品检测：步骤2）分离后的样品通过质谱检测；4）数据分析：使用内标法将步骤3）中所测得的分析物与内标物峰面积进行定量分析。
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