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申请/专利权人：江苏第二师范学院
摘要：本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a及杂交链式反应的检测妥布霉素检测系统及检测方法，包括识别探针TOB‑AP‑5、杂交链式反应扩增元件H1和H2、LbCas12a蛋白、crRNA、F‑Q报告探针。该方法利用识别探针TOB‑AP‑5识别妥布霉素，触发杂交链式反应，进而激活LbCas12a‑crRNA的核酸酶活性，切割F‑Q报告探针，输出荧光信号。该系统设计并优化了妥布霉素适配体序列在识别探针中的位置，提升了检测灵敏度。该系统将CRISPR‑Cas12a的部分激活序列设计在杂交链式反应元件H1的环区，有效提升信噪比。该方法检测线性范围较宽，为0.125nM‑25nM及25nM‑2500nM，检测灵敏度高，最低检测限为25pM，且能在牛奶及牛肉样本中检测妥布霉素，在食品安全及环境监测领域中具有广泛的应用前景。
主权项：1.一种基于CRISPR-Cas12a及杂交链式反应的检测妥布霉素检测系统，其特征在于：包括，核酸探针TOB-AP-5、信号扩增核酸元件H1、信号扩增核酸元件H2、LbCas12a蛋白、crRNA、F-Q报告探针；其中，所述识核酸探针TOB-AP-5为妥布霉素识别元件；信号扩增核酸元件H1和H2为链置换等温扩增反应元件；F-Q荧光报告探针为两端修饰了荧光基团及荧光淬灭基团的单链DNA，是LbCas12a蛋白的反式剪切底物。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏第二师范学院 一种基于CRISPR-Cas12a及杂交链式反应的检测妥布霉素检测系统及检测方法
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