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申请/专利权人:上海朗昇生物科技有限公司
摘要:本发明提供了一种基因药物载体的活性滴度的检测方法,所述的方法包括:提供基因药物载体的系列稀释液;将各个稀释度下的基因药物载体稀释液分别与靶向细胞进行混合,获得基因药物转入的靶向细胞;培养所述基因药物转入的靶向细胞,并从所述培养的基因药物转入的靶向细胞中抽提RNA;以所述抽提的RNA为模板,通过RT‑qPCR检测靶向细胞中所述基因药物转录本的拷贝数;基于预定的阳性判断标准,将各个实验结果分别判定为阳性或阴性,从而获得各个稀释度下的阳性比率;和基于n个稀释梯度下的阳性比率,获得所述基因药物载体的转导滴度,作为所述基因药物载体的活性滴度。本发明方法是一种灵敏、准确、快速且无需辅助病毒的基因药物载体的活性滴度检测方法。
主权项:1.一种基因药物载体的活性滴度的检测方法,其特征在于,所述的方法包括:S1提供基因药物载体的系列稀释液,其中,所述基因药物载体携带有基因药物,并且所述的系列稀释液包括n个稀释梯度的稀释液,其中n为≥3的正整数;S2将各个稀释度下的基因药物载体稀释液分别与靶向细胞进行混合,使所述基因药物载体递送入所述靶向细胞,从而获得基因药物转入的靶向细胞;S3培养所述基因药物转入的靶向细胞一段时间t1,并从所述培养的基因药物转入的靶向细胞中抽提RNA;S4以所述抽提的RNA为模板,通过RT-qPCR检测靶向细胞中所述基因药物转录本的拷贝数;S5基于预定的阳性判断标准,将各个实验结果分别判定为阳性或阴性,从而获得各个稀释度下的阳性比率;和S6基于n个稀释梯度下的阳性比率,获得所述基因药物载体的活性滴度,所述的活性滴度通过转导滴度表示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 上海朗昇生物科技有限公司 基因药物载体的活性滴度的检测方法
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