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申请/专利权人:杭州贤石生物科技有限公司
摘要:本发明提供了一种预交联透明质酸钠多孔微球细胞微载体及其制备方法,属于细胞培养微载体的制备技术领域。本发明方法是先在透明质酸钠的碱溶液中加入交联剂水浴静置进行轻中度预交联,然后经乳化剪切后继续搅拌进一步交联固化,然后对交联固化后的产物进行特定的表面处理后,经冻干获得多孔微球细胞微载体。该方法一方面可以提高交联度改善其机械强度,另一方面在水相中交联确保交联的均匀性。此外,通过本发明的预交联方法,还可以减少交联剂的使用量。同时;经过本发明的表面处理,能够获得孔隙分布均匀,能够很好满足细胞生长和粘附的多孔微球微载体。最后,本发明的乳化法可以大批量生产微载体,且微载体的粒径可根据需求进行调控。
主权项:1.一种预交联透明质酸钠多孔微球细胞微载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1水相溶液的制备:将透明质酸钠与碱性溶液混合,然后向得到的透明质酸钠溶液中加入交联剂,所述交联剂为碳二亚胺、1,4丁二醇二缩水甘油醚或二乙烯基砜中的一种或多种,交联剂的添加量以透明质酸钠溶液的体积占比计为0.1~2%,搅拌分散均匀,于热水浴中静置进行预交联反应,制备成水相溶液;2油相溶液的制备:将油性物质与乳化剂混合,经过乳化剪切,制备成油相溶液;3乳化:将水相溶液与油相溶液混合后乳化,得到乳化液;所述水相溶液和油相溶液的体积比为1:3~10,乳化的转速为800~3000rpm,乳化时间为10min;4搅拌固化:将步骤3所得乳化液于搅拌下进行进一步固化交联;5对步骤4所得物进行清洗,然后采用表面处理液进行表面处理,所述表面处理液为碳酸氢铵,表面处理液的浓度为0.3~3wt%,处理时间为1~4h,处理后的样品经冻干,即得所述多孔微球细胞微载体。
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