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申请/专利权人：云南省农业科学院药用植物研究所;云南植虫药生物科技有限公司

摘要：本发明涉及植物组织培养技术领域，具体来说是一种华东覆盆子组培扩繁方法及应用；步骤包括：选择外植体进行清洁并消毒，消毒好的外植体接种于初代丛生芽诱导培养基中培养，获得丛生芽剪成单芽接种于继代增殖培养基中培养，获得的丛生芽剪成单芽接种于生根培养基中。本发明方法污染率降低到5%以下，丛生芽诱导率从常规植物生长调节剂组合的10%左右提高到70%以上，增殖系数稳定达到4以上，生根率提高至99%以上，同时还可促使苗更加粗壮，更加有利于驯化的成活。

主权项：1.华东覆盆子组培扩繁方法，其特征在于，步骤包括：（1）外植体的选择与清洁：选择端部15～25cm的未木质化幼嫩茎段，去掉叶片，剪成2～3cm的具芽小段，用自来水冲淋30～40min，后用饱和肥皂液涮洗10～15min，后用清水漂洗至无明显肥皂液残留，滴加2～3滴吐温-80，震摇10～15min，最后用自来水冲淋50～70min；（2）外植体的消毒：将清洁好的外植体转移至超净工作台，依次用75%酒精、饱和漂白粉溶液、75%酒精和0.08%升汞消毒；（3）初代丛生芽诱导：将消毒好的外植体用无菌纸吸去表面水分，剪去两端伤口，接种于初代丛生芽诱导培养基中，并置于光强3000～4000lx，单日光照10h，温度25±2℃的环境下培养40～50天；所述初代丛生芽诱导培养基的配方为：WPM培养基+NAA0.02～0.05mgL+CPPU0.10～0.15mgL+TDZ2.0～3.0mgL；（4）继代增殖培养：经初代诱导培养获得丛生芽剪成单芽，接种于继代增殖培养基中，并置于光强3000～4000lx，单日光照10h，温度25±2℃的环境下培养25～35天；所述继代增殖培养基的配方为：改良MS培养基+IBA0.1～0.2mgL+TDZ1.0～2.0mgL+KT5.0～6.0mgL；（5）生根培养：经继代增殖培养获得的丛生芽剪成单芽，接种于生根培养基中，置于温度28±2℃的全黑暗环境下培养5～7天，后置于光强3000～4000lx，单日光照10h，温度25±2℃的全黑暗环境下培养30～35天；所述生根培养基的配方为：14改良MS培养基+IBA0.4～0.6mgL+椰汁50～70mlL+AC0.2～0.4gL；所述改良MS培养基的配方为：硫酸镁使用量调整为0.50gL，硫酸亚铁使用量调整为0.064gL，EDTA-二钠使用量调整为0.087gL，二水氯化钙使用量调整为0.33gL，pH调整为5.4，其余成分不变。

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