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申请/专利权人：凯莱英医药集团(天津)股份有限公司

摘要：本发明提供了一种氨酰‑tRNA合酶突变体及烯基酪氨酰‑tRNA的制备方法。其中，氨酰‑tRNA合酶突变体包括：SEQIDNO：1所示的pNFRS的氨基酸序列发生突变的蛋白，所述突变选自N160突变以及A31、L32、L65、A67、L69、S107、F108、Q109、L110、P158、L159、Y161、E162中的任意一种或多种突变。能够特异性高的识别酪氨酸衍生物，催化酪氨酸衍生物与相应的tRNA结合，形成烯基酪氨酰‑tRNA，适用于酶催化领域。

主权项：1.一种烯基酪氨酰-tRNA的制备方法，其特征在于，利用氨酰-tRNA合酶突变体，催化烯基酪氨酸和tRNA结合，制备获得所述烯基酪氨酰-tRNA，所述烯基酪氨酸为非天然氨基酸；所述氨酰-tRNA合酶突变体选自以SEQIDNO：1所示的pNFRS的氨基酸序列为基础发生如下任一种组合突变的突变体：1）A31S+L32G+P158A+L159T+N160S+Y161M+E162V；2）A31G+L32S+L65V+L69S+S107R+F108S+Q109G+L110R+P158L+L159Q+N160G+Y161Q+E162M；3）A31G+L32C+P158S+L159E+N160E+Y161N+E162L；4）A31C+L32T+P158S+L159Q+N160F+Y161S+E162T；5）A31G+L32V+L65T+A67S+S107A+F108H+Q109S+L110Y+P158D+L159V+N160D+Y161Q+E162I；6）A31T+L32V+L65C+L69V+S107A+F108S+Q109V+L110K+P158M+L159T+N160G+Y161W+E162T；7）L32S+L159D+N160A+Y161S+E162T；8）N160H+L32V+S107T+Q109N+L110I+L159I；9）N160H+L32A；10）N160H+L32V；11）N160H+L32I+L65V+A67S+S107T+F108W+L110R+P158A+L159D+E162D；12）N160H+A31L+L32A+L65I+L69I+L110V+L159A+Y161F；所述烯基酪氨酸为O-烯丙基-L-酪氨酸。

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