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申请/专利权人：甘肃农业大学

摘要：本发明提供了一种番茄果实中16种多酚类物质的提取和测定方法，属于植物多酚提取与含量检测技术领域。本发明提供的方法包括以下步骤：1番茄果实多酚类物质的提取：样品经冷冻干燥后，采用甲醇超声提取，离心后收集上清液，有机滤膜过滤；2采用高效液相色谱仪对番茄果实多酚提取液中的各酚类物质进行测定，分别对流动相、梯度洗脱程序、流速、柱温、进样量和波长进行了优选。最终确定的方法线性关系好，相关系数R2均大于0.998，样品的平均回收率在82.99‑103.41％，检出限在15.625‑31.25μg·L‑1。该方法操作简单、提取效率高、检测灵敏度和精密度好，可应用于番茄果实中多酚类物质的定性和定量分析，对番茄营养品质评价具有重要意义。

主权项：1.一种番茄果实中16种多酚类物质的提取与测定方法，其特征在于，所述16种多酚类物质分别为芦丁、山萘酚、槲皮素、柚皮素、4-香豆酸、肉桂酸、芥子酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸、没食子酸、洋蓟素、绿原酸、阿魏酸、苯甲酸、原儿茶酸、龙胆酸；所述的提取与测定方法包括以下步骤：步骤一：番茄果实中多酚类物质的提取取番茄果实，经干燥研磨成粉，向其中加入甲醇进行超声提取，提取完毕后进行离心，取离心后的上清液用过滤膜过滤，得到番茄果实多酚提取液；所述多酚类物质提取中的番茄果实干粉是将果实洗净、切块后经真空冷冻干燥研磨成粉；所述多酚类物质提取中的番茄果实干粉与提取液的料液比为1:20gmL；所述多酚类物质提取中的超声提取条件为20-25℃超声提取15-20min；所述多酚类物质提取中的离心操作为4℃、8000rpm下离心10min；所述多酚类物质提取中的过滤膜为0.22μm有机膜；步骤二：番茄果实中多酚类物质的定性和定量分析A．采用高效液相色谱仪测定提取液中各种多酚类物质的含量，所述方法中，色谱柱为：WatersSymmetryC18柱250mm×4.6mm，5μm；流动相A为甲醇；流动相B为1%乙酸；流速为0.8-1.2mLmin；柱温为25-40℃；进样量为5-20μL；检测器为DAD；检测波长为240-322nm；洗脱方式为梯度洗脱：0-30min时流动相A体积占5%，流动相B的体积占95％；30-40min时流动相A的体积为30％，流动相B的体积为70％；40-45min时流动相A的体积为40％，流动相B的体积为60％；45-50min时流动相A的体积为50％，流动相B的体积为50％；50-55min时流动相A的体积为70％，流动相B的体积为30％；55-57min时流动相A的体积为40％，流动相B的体积为60％；57-60min时流动相A体积占5%，流动相B的体积占95％；B．标准溶液的配制：取各单酚标准品，分别用色谱甲醇溶解，配制成浓度为500mgL母液，再逐级稀释配成浓度为0.0156、0.0312、0.312、0.625、1.25、2.5、5mgL的标准溶液，进样分析，以峰面积对质量浓度绘制标准曲线；再配制混合标准溶液，进样，得到标准品色谱图；C．根据高效液相色谱仪检测出的番茄样品色谱图与各单酚标准品色谱图进行对比鉴定，并通过样品中各单酚物质的峰面积代入标准曲线方程，计算得到各多酚类物质的含量。

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