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申请/专利权人:浙江海洋大学
摘要:本发明一种检测大黄鱼皮肤叶黄素的方法,包括以下步骤:1)样品预处理;2)样品液制备及叶黄素提取;3)叶黄素标准浓度配制;4)测定波长确定;5)标准曲线建立;6)不同养殖区大黄鱼皮肤叶黄素测定。本发明方法通过在酶标仪上建立吸光度和叶黄素标准品之间的标准曲线,在明确叶黄素是大黄鱼皮肤主要类胡萝卜素的基础上,通过有机试剂抽提皮肤叶黄素后在酶标仪上测定吸光度,从而确定大黄鱼皮肤叶黄素含量,避免了较长的分析时间和节约了样本量。
主权项:1.一种检测大黄鱼皮肤叶黄素的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:1)样品预处理:取大黄鱼皮肤样品,充分剪碎后,加入研磨珠及有机溶剂进行研磨,重复两次,制得样品溶液,将样品溶液置于冰箱中避光保存;2)样品液制备及叶黄素提取:将避光保存的样品溶液离心,吸取上清,再次加入有机溶剂,研磨,重复两次,合并上清后离心,取上清液,制得大黄鱼叶黄素皮肤提取液;3)叶黄素标准浓度配制:取叶黄素标准品,溶解在有机溶剂中,配置母液浓度为5mgmL,进一步用丙酮稀释成1.5625、3.125、6.25、12.5和25μgmL;4)测定波长确定:大黄鱼叶黄素皮肤提取液体和叶黄素标准溶液在酶标仪上进行特定波长扫描,找到最大吸收波长;5)标准曲线建立:取300μL不同浓度的叶黄素标准品置于石英酶标板中,在酶标仪上最大吸收波长处检测吸光度,建立吸光度和浓度之间的标准曲线;6)不同养殖区大黄鱼皮肤叶黄素测定:采集来不同地方来源的养殖大黄鱼和野生大黄鱼,每个来源取3个生物学平行样本,皮肤叶黄素经上述方法提取后在酶标仪检测吸光度,从而获得不同地区大黄鱼皮肤叶黄素的浓度。
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