买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：中国农业大学

摘要：本发明属于生物工程技术，公开了一种基于人源肝细胞系HepG2的维生素B3缺乏模型制备方法和应用；所述方法包含以下步骤：1复苏HepG2细胞，并用DMEM培养基含血清培养；2细胞密度长到80％左右进行传代，使用DMEM培养基含血清连续三次传代；3换维生素B3缺乏培养基含血清连续进行三次传代，制作缺乏维生素B3的HepG2模型。本发明对DMEM细胞培养基无血清的成分进行了调整，通过该定制培养基对HepG2细胞进行传代培养使其达到维生素B3缺乏状态，细胞增殖速率在细胞培养第3天时显著提高，模型构建成功率可达95％以上。本发明采用优化细胞培养基和细胞培养方案的手段，可使HepG2细胞充分表现出因维生素B3摄入不足而导致其缺乏的生理状态，并可采用维生素B3缺乏培养基传代培养细胞使其继续维持维生素B3缺乏生理状态，可作为永生化细胞的基础生理模型满足不同的实验需求，具有广泛的应用前景。

主权项：1.一种基于人源肝细胞系HepG2的维生素B3缺乏模型制备方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤：1复苏HepG2细胞，并用DMEM培养基含血清培养；2细胞密度长到80％左右进行传代，使用DMEM培养基含血清连续三次传代，分对照组1和维生素B3缺乏模型构建组1；3将步骤2所述维生素B3缺乏模型构建组1换维生素B3缺乏培养基含血清连续进行三次传代，制作缺乏维生素B3的HepG2模型，获得维生素B3缺乏模型构建组2；将步骤2所述对照组1使用DMEM培养基含血清继续培养，细胞密度长到80％左右传代，获得维生素B3缺乏模型构建组2；4将步骤3所述维生素B3缺乏模型构建组2换维生素B3缺乏培养基进行培养无血清，获得维生素B3缺乏模型构建组3；将步骤3所述对照组2换DMEM培养基无血清，获得对照组3；5将步骤4所述实验组3换维生素B3缺乏培养基培养含血清继续培养；将步骤4所述对照组3使用DMEM培养基含血清继续培养；继续按照步骤2-4制备模型；任选地，所述DMEM培养基含血清为在DMEM培养基Hyclone，SH30022.01中添加10％的胎牛血清和1％的抗生素；所述DMEM培养基无血清为在DMEM培养基Hyclone，SH30022.01中添加1％的抗生素；所述维生素B3缺乏培养基无血清组分为将商用DMEM高糖培养基Hyclone，SH30022.01中维生素B3成分进行删除，并且调低了色氨酸L-Tryptophan含量至10.2mgL；所述维生素B3完全培养基含血清为在维生素B3缺乏培养基中添加10％的胎牛血清和1％的抗生素。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业大学 一种基于人源肝细胞系HepG2的维生素B3缺乏模型制备方法和应用