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使用纳米孔确定多核苷酸特征的方法和用于该方法的复合物 

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申请/专利权人:牛津纳米孔科技公开有限公司

摘要:使用纳米孔表征分析物的方法。一个方面的特征在于使用纳米孔表征双链多核苷酸,例如不使用连接所述双链多核苷酸的模板和互补序列的发夹的方法。另一方面的特征在于使用标签修饰的纳米孔表征分析物的方法,其具有增加的灵敏度和或更高的通量。还提供了可以用于所述方法中的组合物和系统,其包括例如用于附接于双链多核苷酸的衔接子和标签修饰的纳米孔。

主权项:1.一种使用纳米孔确定多核苷酸特征的方法,所述方法包括:i提供包括第一模板多核苷酸链和第二互补多核苷酸链的双链多核苷酸,其中所述第一模板多核苷酸链和所述第二互补多核苷酸链不共价连接,其中衔接子附接于所述双链多核苷酸的两个末端中的一个或两个上,其中每个衔接子包含双链体茎和从所述双链体茎延伸的第一单链,其中多核苷酸解链酶与从所述双链体茎延伸的所述第一单链结合,其中,当所述衔接子附接于所述双链多核苷酸的两个末端上时,一个衔接子的第一单链与所述第一模板多核苷酸链邻接且另一个衔接子的第一单链与所述第二互补多核苷酸链邻接;ii使所述第二互补多核苷酸链上的结合位点与缀合到所述纳米孔的内腔外部的所述纳米孔的外缘的寡核苷酸标签可逆性结合,其中所述第二互补多核苷酸链上的结合位点包括与所述寡核苷酸标签互补的序列,并且所述第二互补多核苷酸链上的结合位点在所述第一模板多核苷酸链易位通过所述纳米孔期间暴露;iii在相对于所述纳米孔移动所述第一模板多核苷酸链的同时测量通过所述纳米孔的电流,其中所述测量值指示所述第一模板多核苷酸链的一个或多个特征;iv在相对于所述纳米孔移动所述第二互补多核苷酸链的同时测量通过所述纳米孔的电流,其中所述测量值指示所述第二互补多核苷酸链的一个或多个特征;和v基于在步骤iii中获得的测量值来表征所述第一模板多核苷酸链,并且基于在步骤iv中获得的测量值来表征所述第二互补多核苷酸链。

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权利要求:

百度查询: 牛津纳米孔科技公开有限公司 使用纳米孔确定多核苷酸特征的方法和用于该方法的复合物

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