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基于QuEChERS法建立的棉花叶片中植物激素的HPLC-MS/MS检测方法 

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申请/专利权人:中国农业科学院棉花研究所

摘要:本发明属于分析化学领域,提供了一种基于QuEChERS法建立的棉花叶片中植物激素的HPLC‑MSMS检测方法。该方法可对棉花叶片中的ZR、ZT、IAA、GA3和ABA等多种植物激素同时进行检测与定量,该方法包括:对新鲜叶片进行前处理,制备待测液,高效液相色谱‑串联质谱检测等操作,采用电喷雾电离正负离子同时扫描模式和多反应监测扫描模式,可同时对5种植物激素中的一种或多种进行定性或定量检测。本发明提供的方法具有良好的特异性、选择性与精密度,可以实现低定量限,高线性范围的检测,一个样品的检测时间仅6min,因此本发明可以有效提高分析效率,适用于棉花叶片中植物激素的检测。

主权项:1.一种基于QuEChERS法建立的棉花叶片中植物激素的HPLC-MSMS检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)QuEChERS前处理:称取2.5±0.05g的棉花叶片置于离心管中,研磨粉碎,加入7.5mL提取溶液,再加入0.25mL去离子水;使用高速匀浆机高速匀浆提取1min后5000rmin离心5min,吸取1.8mL离心后得到的上清液置于含有150mgMgSO4+30mgC18的QuEChERS离心管中,涡旋混合1min,以4000rmin离心5min,过0.22μm亲水性PTFE滤膜后,得前处理样品;(2)配制不同浓度的植物激素混合标准溶液,绘制标准曲线;(3)使用高效液相色谱-串联质谱法对前处理样品中的植物激素进行定性定量检测;所述植物激素为ZR、ZT、IAA、GA3和ABA;步骤(1)中,所述提取溶液为含有1mmolLBHT的0.1%乙酸甲醇;步骤(3)中,所述液相色谱-串联质谱法的色谱条件为:色谱柱:Shim-packC18色谱柱,150mm×3.0mm,3μm;自动进样器温度为15℃,柱温:40℃;流动相:流动相A相为0.1%乙酸-甲醇溶液,流动相B相为0.1%甲酸-水溶液;流速:0.4mLmin;洗脱时间为6min;洗脱方式为梯度洗脱;所述梯度洗脱的过程为: ;所述液相色谱-串联质谱法的质谱条件包括:离子源:电喷雾离子源,正负离子扫描模式;气帘气压力:35psi;喷雾器压力:40psi;辅助加热气压力:40psi;正离子电离模式下离子化电压:5500kV;负离子电离模式下离子化电压:-4500kV。

全文数据:

权利要求:

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