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心肌细胞诱导和生长培养基 

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申请/专利权人:上海中医大生物科技有限公司

摘要:本发明涉及生物技术领域,涉及心肌细胞诱导和生长培养基,公开了一个稳定、经济地生产心肌细胞的无血清生产方法,整套系统分为诱导分化系统IS,inducedsystem和长期培养系统LCS,long‑termculturesystem。诱导分化系统的组分包括:氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖、谷胱甘肽、HEPES、酚红、重组人白蛋白、抗坏血酸;长期培养体系的组分包括:氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖、谷胱甘肽、HEPES、酚红、抗坏血酸、转铁蛋白、胰岛素、亚硒酸钠、脂质浓缩物。整套系统规避了常规不稳定的混合物添加剂的成分,提高了心肌细胞分化和培养的稳定性,且整套系统添加剂价格低廉,适用于大规模心肌细胞生产。

主权项:1.一种诱导DYR0100细胞分化为心肌细胞的方法,包括:(1)用含有1-20μM的GSK-3α抑制剂或GSK-3β抑制剂的分化培养基孵育DYR0100细胞,(2)用含有1-20μM的Wnt通路抑制剂的分化培养基继续孵育,和(3)用不含GSK-3α抑制剂或GSK-3β抑制剂和Wnt通路抑制剂的分化培养基继续孵育,(4)用生长培养基孵育步骤(3)得到的细胞,其中,所述分化培养基包含氨基酸、维生素、无机盐、0.5-5gL碳源、0.1-2mgL谷胱甘肽、0.1-0.25gL白蛋白、0.1gL抗坏血酸或由其组成,所述生长培养基包含氨基酸、维生素、0.5-5gL碳源、0.1-2mgL谷胱甘肽、0.1-2gL转铁蛋白、0.1-0.8gL抗坏血酸、0.1-3mgL亚硒酸钠、0.1-5%脂质浓缩物、0.1-5gL胰岛素、无机盐、pH调节剂或由其组成。

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