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申请/专利权人：沧州市天津工业大学研究院
摘要：本发明涉及一种辣根过氧化物酶介导的表面引发制备表面印迹微球的方法及其应用。包括以纳米微球的制备和修饰；将主单体、功能单体、多肽交联剂和模板蛋白混合溶解在水溶性溶剂中获得预聚液；向混合溶液中加入辣根过氧化物酶修饰的纳米微球和引发剂，引发自由基聚合；洗脱模板蛋白，获得多肽交联的表面印迹微球。本发明公开的纳米印迹微球通过酶介导的自由基聚合方法制备，可以在高浓度下实现单体与模板的充分预组装来改善传统自由基聚合存在的印迹效果差的难题，同时避免高浓度反应条件下的可能出现的团聚现象。多肽交联剂的引入使印迹微球对目标蛋白具有高度特异性选择和识别能力，并能大幅缩短吸附模板蛋白的时间。
主权项：1.一种辣根过氧化物酶介导的表面引发制备表面印迹聚合物微球的方法；其特征是，包括以下步骤：1通过辣根过氧化物酶HRP与经过活化的羧基功能化的纳米微球进行酰胺化反应，将HRP固定在微球表面作为活性位点，得到HRP修饰的纳米印迹微球；2将步骤1中所得HRP修饰的纳米微球在超声下分散在磷酸盐缓冲溶液中，获得HRP纳米印迹微球的分散液；3将主单体N-异丙基丙烯酰胺，功能单体丙烯酰胺、甲基丙烯酸和甲基丙烯酸二甲氨基乙酯，多肽交联剂以及模板蛋白牛血清白蛋白BSA加入到步骤2中的HRP纳米印迹微球的分散液中；待完全溶解后，搅拌混合均匀，静置来完成充分预组装过程，得到预聚合混合溶液；4向步骤3得到的预聚合混合溶液中通N2排除体系中的O2；5在机械搅拌和N2氛围下，对步骤4排除体系O2之后的溶液进行pH调节，使多肽交联剂处于helix构象条件时，向其中加入乙酰丙酮和过氧化氢，通过HRP催化下引发自由基聚合反应；反应结束后，对溶液中的微球进行磁分离，然后使用超纯水洗涤两次后，得到印迹有模板的表面印迹微球。6将步骤5所得表面印迹纳米微球在磷酸盐缓冲溶液中，进行模板的洗脱，然后得到具有印迹空腔的纳米印迹微球。
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百度查询： 沧州市天津工业大学研究院 一种辣根过氧化物酶介导的表面引发制备表面印迹聚合物微球的方法及其应用
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