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用于消耗和富集核酸序列的方法和试剂盒 

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申请/专利权人:华盛顿大学

摘要:用于富集靶核酸序列,如包含靶核酸序列的核酸分子的试剂盒和方法,和用于消耗靶核酸序列,如包含靶核酸序列的核酸分子的试剂盒和方法。在实施方案中,所述用于富集靶核酸序列的方法包括选择性降解单链样品核酸分子,如不包含靶核酸序列的那些。在实施方案中,所述用于消耗靶核酸序列的方法包括选择性降解双链样品核酸分子,如包含靶核酸序列的那些。

主权项:1.一种用于富集靶核酸序列的方法,所述方法包括:(a)向包含多个样品核酸分子的样品溶液中引入与所述多个样品核酸分子中的一个或多个样品核酸分子的靶核酸序列互补或部分互补的捕获引物核酸分子,所述样品核酸分子各自包含通用衔接子核酸序列,所述通用衔接子核酸序列包含一个或多个核糖核苷酸,其中所述样品核酸分子的除了所述通用衔接子核酸序列中的所述一个或多个核糖核苷酸以外的核苷酸是脱氧核糖核苷酸;(b)酶促延伸与所述一个或多个样品DNA分子的靶核酸序列退火的捕获引物核酸分子,其中所述延伸在所述一个或多个样品核酸分子内复制所述通用衔接子核酸序列,从而使所述通用衔接子核酸序列成为双链;(c)使用核糖核酸内切酶酶促降解所述样品溶液中的单链样品核酸分子,以产生比所述样品溶液中的比例具有更高比例的包含靶核酸序列的非降解样品核酸分子的富集的样品溶液;其中所述核糖核酸内切酶被配置成在所述通用衔接子核酸序列内的一个或多个核糖核苷酸处切割所述单链样品核酸分子,但是不切割双链样品核酸分子;(d)将多个扩增引物核酸分子引入富集的样品溶液,其中所述多个扩增引物核酸分子中的扩增引物核酸分子与所述通用衔接子核酸序列互补;和(e)对具有所述多个扩增引物核酸分子的富集的样品溶液中的所述多个样品核酸分子进行核酸扩增反应,以提供扩增的富集的样品溶液,其中对所述富集的样品溶液中的所述多个样品核酸分子进行核酸扩增反应不扩增或基本上不扩增已经被核糖核酸内切酶降解的样品核酸分子。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华盛顿大学 用于消耗和富集核酸序列的方法和试剂盒

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