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肉苁蓉饮片基原植物PCR-RFLP鉴别方法 

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申请/专利权人:宁夏回族自治区药品检验研究院

摘要:一种肉苁蓉饮片基原植物PCR‑RFLP鉴别方法包括以下步骤:提取待测饮片DNA;对提取的DNA的ITS序列进行PCR扩增,退火温度为47℃,循环数为35,扩增引物为ITS‑F:5'‑AACCTGCGGAAGGATCATTGTC‑3',ITS‑R:5'‑TGATATGCTTAAACTCAGCGGGTA‑3';利用NcoI限制性内切酶对扩增产物进行酶切,酶切底物量为7.5μL,酶切时间为60min;观察ITS序列是否被酶切成两条条带,如果ITS序列被切成两个条带,那么待测饮片为肉苁蓉;如果ITS序列仍为一个条带,那么待测饮片为管花肉苁蓉。在电泳图上,肉苁蓉出现能够出现两条明显的色带,而管花肉苁蓉只有一条色带,鉴别的准确性高。

主权项:1.一种肉苁蓉饮片基原植物PCR-RFLP鉴别方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤S1:提取待测饮片DNA;步骤S2:对提取的DNA的ITS序列进行PCR扩增,退火温度为47℃,循环数为35,扩增引物为ITS-F:5'-AACCTGCGGAAGGATCATTGTC-3',ITS-R:5'-TGATATGCTTAAACTCAGCGGGTA-3';步骤S3:利用NcoI限制性内切酶对扩增产物进行酶切,酶切底物量为7.5μL,酶切时间为60min;步骤S4:观察ITS序列是否被酶切成两个条带,如果ITS序列被切成两个条带,那么待测饮片为肉苁蓉;如果ITS序列仍为一个条带,那么待测饮片为管花肉苁蓉。

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权利要求:

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