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申请/专利权人：南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心)

摘要：本发明公开了一种以Zr‑MOF为载体的比色和电化学发光增强的双信号探针合成方法与应用，本发明的首要目的是基于Zr‑MOF富集纳米酶和电化学发光分子策略提供一种信号增强型双信号探针。基于Zr‑MOF高比表面积和高孔隙率等优点，以Zr‑MOF为载体，依次引入两层电化学发光分子和丰富的纳米酶，得到高效比色和电化学发光信号增强的纳米晶体。然后，通过化学键的形成或者静电相互作用，与带氨基或巯基的核酸探针或抗体偶联，最终制备得到一种新型的、高灵敏的双信号探针。本发明有望简化核酸和蛋白标志物检测过程，缩短检测时间并保证高灵敏分析性能，对感染性疾病的及时、准确诊断具有重要科学价值和现实意义。

主权项：1.一种以Zr-MOF为载体的比色和电化学发光增强的双信号探针合成方法，其特征在于，包括如下步骤；步骤一、制备单层Ru富集的纳米晶体Ru@U6-NH2；将48mg氯化锆，39.2mg二氨基对苯二甲酸和6.5mg三联吡啶钌溶解在18mLN,N-二甲基甲酰胺中，然后加入300μL乙酸和12mLN,N-二甲基甲酰胺，混匀后转移至高压反应釜，在120℃反应24小时，自然冷却至室温，8000rpm离心，将沉淀用乙醇和水洗涤后，分散在30mL超纯水中得到Ru@U6-NH2；步骤二、制备双层Ru富集的纳米晶体Ru@U6-Ru：将38μLNHS10mgmL和EDC10mgmL加入2mL三4,4-二羧基联吡啶氯化钌的PBS溶液1mgmL，在室温下反应1小时，然后加入10mL上述步骤一所得的Ru@U6-NH2，在室温反应过夜，8000rpm离心，将沉淀用乙醇和水洗涤后，分散在10mL超纯水中得到Ru@U6-Ru；步骤三、制备纳米酶PtNPs：将20mg聚乙烯吡咯烷酮Mw＝58000溶解在45mL乙醇中，逐滴加入5mL氯铂酸水溶液6mM，然后加热回流3小时得到纳米酶PtNPs；步骤四、制备纳米酶PtNPs和双层Ru富集的纳米晶体Ru@U6-RuPt：将15mLPtNPs和10mL上述步骤二所得的Ru@U6-Ru混匀后，超声30分钟，8000rpm离心，将沉淀用乙醇和水洗涤后，分散在10mL超纯水中得到Ru@U6-RuPt；步骤五、制备比色和电化学发光增强的双信号探针Ru@U6-RuPt-DNA：将巯基修饰的核酸探针用TCEP室温还原1h，DNA:TCEP＝1:10加入上述步骤四所得的1mLRu@U6-RuPt溶液中，在室温下搅拌过夜，8000rpm离心，分散在0.5mL超纯水中得到比色和电化学发光增强双信号探针Ru@U6-RuPt-DNA。

全文数据：

权利要求：

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