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申请/专利权人：杭州微远生物科技有限公司
摘要：本申请公开了一种肝素钠样品的琼脂糖凝胶电泳检测方法及胶板，首先制作胶板，称取琼脂糖，用乙酸钡溶解至，溶解前称重，溶解时保鲜膜覆盖防止水分流失，溶解后补足蒸发的水分，4℃保存，在水平面上静置至胶凝固；点样，向孔里加注样品，在第一个孔和最后一个孔加入甲酚红溶液，其他孔依次加入对照品及样品；第一次跑胶，将电泳槽外沿浸泡在冰水混合物中，在乙酸钡溶液中跑胶；第二次跑胶，在1，3‑丙二胺乙酸缓冲液中跑胶；固定，用十六烷基三甲基溴化铵固定；干燥，吹干或烘干并冷却到室温；染色，用甲苯胺蓝染色；脱色，先用纯水洗涤，再用脱色液脱色，本发明实现了对肝素钠中含量较低的杂质进行相关检测，灵敏度达到0.3％以上。
主权项：1.一种肝素钠样品的琼脂糖凝胶电泳检测方法，其特征在于，包括:步骤一：制作胶板，称取0.3-0.6g琼脂糖，用pH为5.8-7.8的0.001-0.04M乙酸钡pH5.8-7.8溶解至100ml，溶解前称重，溶解时保鲜膜覆盖防止水分流失，溶解后补足蒸发的水分，4℃保存，每块胶用20-50g琼脂糖凝胶液体制作，在水平面上静置30-60min至胶凝固；步骤二：点样，向孔里加注样品，在第一个孔和最后一个孔加入甲酚红溶液，其他孔依次加入对照品及样品，各4-10μL；步骤三：第一次跑胶，将电泳槽外沿浸泡在冰水混合物中，在170-200mL乙酸钡溶液中跑胶，恒压80-100v，电流40-53mA，跑胶时长20-40min；步骤四：第二次跑胶，在170-200mL的1，3-丙二胺乙酸缓冲液中跑胶，恒压70-100v，电流70-100mA，跑胶时长60-90min；步骤五：固定，用0.1％-1％的十六烷基三甲基溴化铵固定30-60min；步骤六：干燥，吹干或烘干并冷却到室温；步骤七：染色，用0.1％-1％甲苯胺蓝染色1-2h；步骤八：脱色，先用纯水洗涤，再用脱色液脱色。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 杭州微远生物科技有限公司 肝素钠样品的琼脂糖凝胶电泳检测方法及胶板
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