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抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体、结合表位分析方法 

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申请/专利权人:简达生物医药(南京)有限公司

摘要:本发明属于抗体技术领域,具体涉及抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体、结合表位分析方法。VZVgE蛋白为免疫原免疫小鼠,确定蛋白效价,融合实验,亚克隆实验,得到单克隆抗体,分析方法:确定抗体识别表位均为构象表位;分析VZVgE蛋白完整结构,预测二硫键位置及抗原表位;对预测形成二硫键或影响二硫键形成的VZVgE序列中的半胱氨酸残基逐个突变和鉴定;将重组突变质粒进行转染与表达,检测突变及野生型蛋白表达;检测单克隆抗体活性;检测相同表达量的突变蛋白分别对应单克隆抗体的活性;检测单克隆抗体亲和力。应用:药物组合物、试剂、试纸条或试剂盒、生物制品。本发明填补了目前针对VZVgE蛋白抗原构象表位分析的空缺。

主权项:1.抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体结合表位的分析方法,其特征在于,包括以下步骤:确定抗体识别表位均为构象表位而非线性表位;所述抗体包括单克隆抗体,单克隆抗体包括抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体;利用生物信息学分析VZVgE蛋白完整结构,对二硫键位置及抗原表位预测;使用氨基酸定点突变技术对预测可能形成二硫键或影响二硫键形成的VZVgE序列中的半胱氨酸残基逐个进行定点突变以及对PCR产物进行鉴定;将重组突变质粒进行转染与表达,同时检测突变及野生型蛋白在细胞中表达情况;检测突变及野生型蛋白分别对应单克隆抗体的活性;检测相同表达量的突变蛋白分别对应单克隆抗体的活性;检测突变蛋白分别对应单克隆抗体亲和力。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 简达生物医药(南京)有限公司 抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体、结合表位分析方法

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