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申请/专利权人:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
摘要:本发明涉及生物技术领域,提供一种利用CRISPR‑CAS9系统敲除猪胎儿成纤维细胞系中APOC3基因的方法,其是根据猪APOC3基因序列,设计并合成靶向猪APOC3基因的sgRNA,然后构建含有所述sgRNA的CRISPR‑Cas9打靶载体,转入猪胎儿成纤维细胞中,获得APOC3基因敲除的猪胎儿成纤维细胞。利用本方法获得的纯合的APOC3基因敲除细胞株,可用于APOC3基因敲除猪的制备,以此为模型研究高甘油三酯血症、动脉粥样硬化等代谢疾病,揭示疾病发生机制,寻找有效治疗方法。
主权项:1.猪APOC3基因打靶载体,其特征在于,所述打靶载体是基于CRISPR-Cas9系统的sgRNA表达载体,sgRNA作用位点位于猪APOC3基因的2、3号外显子上,sgRNA作用位点的DNA序列如SEQIDNO:1和3所示。
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