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一种促进中轻度损伤皮肤快速修复愈合的凝胶的制备方法 

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申请/专利权人:内蒙古奕宏医学研究有限公司

摘要:本发明涉及生物医学技术领域,具体公开了一种促进中轻度损伤皮肤快速修复愈合的凝胶的制备方法,包括如下步骤:S1、制备脐带血白细胞因子;S2、利用步骤S1制得的脐带血白细胞因子进行脐带间充质细胞的培养;S3、收集步骤S2中培养液的上清液;S4、使用步骤S3收集的上清液制备凝胶;本发明通过制备脐带血白细胞因子培养脐带间充质细胞,得到富含多种生长因子的细胞上清液,以此上清为基础液,制备出了一种用于慢性难愈合性创面溃疡和皮肤损伤的快速修复凝胶;动物和人体试验结果表明这种凝胶可促进皮肤损伤创面快速修复并愈合,可以使受伤的创面的修复进程加快一倍时间。

主权项:1.一种促进中轻度损伤皮肤快速修复愈合的凝胶的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:S1、制备脐带血白细胞因子;所述步骤S1包括以下步骤:S11、采集脐带血,并将脐带血保存在含有ACD-A抗凝剂的一次性血袋中运送到实验室;S12、将脐血转入到50ml离心管中,550g离心20分钟,将上层血浆和白膜层转移到50ml离心管中;S13、将原离心管再经过1000g二次离心10分钟,再次收集血浆和白膜层;S14、将第二次收集的血浆和白膜层合并到第一次收集的离心管中,-75℃~-85℃冷冻保存;S15、进行传染病和内毒素检测;S16、符合要求的上清混合物置于35℃~38℃水浴锅中融化,分别经过0.45μm和0.1μm的微孔滤膜过滤,获得脐带血白细胞因子混合物提取液;S17、脐带血白细胞因子混合物提取液置于-75℃~-85℃冷冻保存备用;S2、利用步骤S1制得的脐带血白细胞因子进行脐带间充质细胞的培养;所述步骤S2包括以下步骤:S21、经37℃解冻后的脐带间充质干细胞转移至加入8ml培养液的15ml离心管中,轻轻混匀,1500g离心5分钟;S22、弃上清液,2ml重悬细胞,进行细胞计数;S23、在T175培养瓶中加入20ml上述培养液,按1×104个细胞cm2接种至培养瓶中,轻轻摇晃混匀,放入37℃、5%CO2培养箱中培养;S3、收集步骤S2中培养液的上清液;S4、使用步骤S3收集的上清液制备凝胶;所述步骤S4包括以下步骤:S41、在无菌的500ml离心管中,加入步骤S3收集的上清液,再加入0.5-2.5%的医用级无菌的卡波姆980、1-10%的甘油和1-10%脐带血白细胞因子提取液,混匀;S42、用经过0.2μm过滤除菌的10%的NaOH调节凝胶pH值为6.8-7.2,混匀;S43、3000g离心10分钟,分装在20ml不透光亚克力真空瓶中,4℃保存。

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