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申请/专利权人：大连理工大学
摘要：本发明属于环境监测技术领域，涉及一种保留较高酶活性的ZIF‑8原位固定化酶的方法及其应用。本发明在水相中将具有金属活性较弱的乙酸锌与2‑甲基咪唑先混合，再加入乙酰胆碱酯酶、胆碱氧化酶和辣根过氧化物酶完成酶的固定。本发明方法降低了2‑甲基咪唑的较高pH以及游离Zn2+的络合作用对酶活性的抑制，从而使固定的酶保留了游离酶91％的催化活性，并且由于乙酸锌的金属活性较弱导致ZIF‑8的成核较慢，从而能够实现对酶的包埋。该制备方法简单、快捷，成本低，并利用三种酶的级联催化反应，实现了对有机磷农药的快速灵敏比色生物传感检测。
主权项：1.一种ZIF-8原位固定化酶的方法，其特征在于，所述方法先将乙酸锌水溶液与2-甲基咪唑水溶液混合后静置10分钟，再加入乙酰胆碱酯酶、胆碱氧化酶和辣根过氧化物酶混合反应得到；所述乙酸锌水溶液的浓度为32mM，所述2-甲基咪唑水溶液的浓度为1280-1600mM，所述乙酸锌水溶液与2-甲基咪唑水溶液混合的比例为1:1，所述乙酰胆碱酯酶、胆碱氧化酶和辣根过氧化物酶混合的比例为1:2:20，所述乙酰胆碱酯酶、胆碱氧化酶和辣根过氧化物酶与混合液的比例依次为2UmL、4UmL、40UmL；所述方法包括以下步骤：1将乙酸锌水溶液与2-甲基咪唑水溶液混合后静置10分钟得到混合溶液；2在步骤1得到的混合溶液中加入乙酰胆碱酯酶、胆碱氧化酶和辣根过氧化物酶，室温搅拌1-2.5小时反应得到混合物；3反应结束后混合物离心水洗，收集沉淀，干燥后即得ZIF-8原位固定化酶。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 大连理工大学 一种保留较高酶活性的ZIF-8原位固定化酶的方法及其应用
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