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申请/专利权人：西部(重庆)科学城种质创制大科学中心
摘要：本发明公开了一种嗜水气单胞菌pspC基因突变株的制备方法及应用，属于微生物技术领域，S1、提取嗜水气单胞菌全基因组，构建pspC基因敲除所使用的引物；S2、以所提取的嗜水气单胞菌全基因组为模板，使用引物进行目的基因上下游同源臂扩增和重叠延伸，得到缺失后的pspC基因片段；S3、缺失后的pspC基因片段导入自杀质粒pRE112，得到重组质粒pRE112‑ΔpspC；S4、将重组质粒pRE112‑ΔpspC转入E.colism10λ感受态细胞，通过接合转移构建同源重组突变株，再通过蔗糖压力筛选，得到所述嗜水气单胞菌突变株ΔpspC。本发明通过分子克隆技术、OverlapPCR技术和同源重组技术，利用自杀载体对嗜水气单胞菌pspC基因进行框内缺失突变，获得基因缺失的，且能稳定遗传的嗜水气单胞菌突变菌ΔpspC。
主权项：1.一种嗜水气单胞菌pspC基因突变株的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，S1、提取嗜水气单胞菌全基因组，构建pspC基因敲除所使用的引物；S2、以所提取的嗜水气单胞菌全基因组为模板，使用引物进行目的基因上下游同源臂扩增和重叠延伸，得到缺失后的pspC基因片段；S3、缺失后的pspC基因片段导入自杀质粒pRE112，得到重组质粒pRE112-ΔpspC；S4、将重组质粒pRE112-ΔpspC转入E.colism10λ感受态细胞，通过接合转移构建同源重组突变株，再通过蔗糖压力筛选，得到所述嗜水气单胞菌突变株ΔpspC。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西部(重庆)科学城种质创制大科学中心 一种嗜水气单胞菌pspC基因突变株的制备方法及应用
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