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申请/专利权人：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
摘要：本发明公开了一种牦牛睾丸支持细胞的分离纯化方法，涉及细胞培养技术领域，其技术方案要点是：包括以下步骤：组织采集与初步处理、梯度降温与冷冻保存、组织复苏、细胞消化与分离、细胞终止消化与重悬、细胞培养与纯化；本发明使用酶解法从牦牛睾丸组织分离支持细胞，摸索出了适于牦牛睾丸支持细胞的合理培养方法，为牦牛睾丸支持细胞的分离纯化提供了依据，同时也为今后牦牛睾丸支持细胞进行的一系列研究提供了方法和途径。
主权项：1.一种牦牛睾丸支持细胞的分离纯化方法，其特征是：包括以下步骤：组织采集与初步处理：牦牛睾丸组织采集后冲洗，切成组织块，将组织块放入冻存管中，混匀并标记管号；梯度降温与冷冻保存：将装有组织块悬液的冻存管在梯度降温盒中室温放置，埋于干冰中过夜降温，最终置于液氮中保存；组织复苏：从液氮中取出冻存的睾丸组织后，在水浴中复苏，转移至复苏液中再次水浴复苏，洗涤后将其剪碎；细胞消化与分离：将剪碎的组织块在消化液中消化至游离曲细精管显现后离心弃上清，再用胰蛋白酶二次消化，直至获得单细胞悬液；细胞终止消化与重悬：用胎牛血清终止胰酶消化，将细胞悬液吹打均匀后过滤，离心去除上清液，重悬细胞并培养；细胞培养与纯化：将所述单细胞悬液置于在培养瓶中培养，再洗涤消化，加入等体积的完全培养基终止消化。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 一种牦牛睾丸支持细胞的分离纯化方法
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