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申请/专利权人:维通达(苏州)生物技术有限公司
摘要:本发明公开了一种鼠胚胎玻璃化冷冻保存和复苏方法,涉及生物技术领域。包括以下步骤:1鼠胚胎冻存前检验;2使用预处理液对检验后的鼠胚胎进行预处理;3将预处理后的鼠胚胎转移至冻存液中进行冻存;4使用复苏液TS1和TS2对鼠胚胎进行复苏。本发明提供的鼠胚胎玻璃化冷冻保存和复苏方法,使得囊胚发育率和仔鼠存活数均较高,从胚胎复苏移植代孕受体出生大小鼠的结果看,本发明的冷冻保存和复苏方法的存活仔鼠数较高,可以快速及时的实现部人源化大小鼠品系保种成功,具有重要的应用价值。
主权项:1.一种鼠胚胎玻璃化冷冻保存和复苏方法,其特征在于,包括以下步骤:1鼠胚胎冻存前检验;2使用预处理液对检验后的鼠胚胎进行预处理;3将预处理后的鼠胚胎转移至冻存液中进行冻存;4使用复苏液TS1和TS2对鼠胚胎进行复苏;步骤2中所述的预处理液由丙二醛和PB1溶液组成,丙二醛和PB1溶液的体积比为1:8-10;步骤3中所述的冻存液包括以下组分:0.1-1gml蔗糖、0.1-2%vv聚果糖、0.1-5%vv乙二醇、0.01-1%vv丙二醇;步骤4中所述的复苏液TS1由M2溶液和蔗糖组成,所述的蔗糖的含量为0.1-1gml;步骤4中所述的TS2由TS1和M2溶液组成,所述的TS1和M2溶液的体积比为0.1-1:1。
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