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申请/专利权人:合肥工业大学
摘要:本发明涉及属于生物药品制造技术领域,具体涉及一种从鸡蛋清中提取高溶解性卵转铁蛋白的方法,蛋清使用水稀释,加入FeCl3溶液,使用NaOH溶液调节溶液pH,高速剪切;将预处理后的鸡蛋清溶液进行超声和高压交变电场处理;加入无水乙醇,离心取上清液进行超滤,加水浓缩,得到卵转铁蛋白粗品溶液;向卵转铁蛋白粗品溶液中加入树脂,使用柠檬酸溶液调节pH,过滤除去树脂,得到滤液;加入PEG8000,调节pH,离心取沉淀,水溶解沉淀,进行超滤,不断加水进行浓缩从而获得浓缩后的卵转铁蛋白。本发明提取所得卵转铁蛋白溶解度和铁结合能力高,可再度结合铁元素制备卵转铁蛋白铁制剂用于改善缺铁性贫血,整个制备过程绿色环保、成本低且可大规模工业化生产。
主权项:1.一种从鸡蛋清中提取高溶解性卵转铁蛋白的方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:(1)鸡蛋清的预处理:蛋清使用水稀释,搅拌均匀;(2)稀释后的鸡蛋清溶液加入FeCl3溶液,使用NaOH溶液调节溶液pH,高速剪切使FeCl3充分分散于溶液中,得到预处理后的鸡蛋清溶液;(3)超声复合高压交变电场处理:将(2)中预处理后的鸡蛋清溶液进行超声和高压交变电场处理;(4)醇提:经步骤(3)处理后的鸡蛋清溶液加入无水乙醇至乙醇终浓度为40%~45%,离心取上清液,过滤除去悬浮的杂质;(5)初次超滤:将上清液进行超滤,加水进行浓缩,除去乙醇、未与卵转铁蛋白鳌合的Fe3+以及分子量小于卵转铁蛋白的部分杂蛋白,得到卵转铁蛋白粗品溶液;(6)卵转铁蛋白脱除Fe3+:向卵转铁蛋白粗品溶液中加入树脂,使用柠檬酸溶液调节pH,促进卵转铁蛋白释放Fe3+,充分搅拌至游离的Fe3+被完全吸附后过滤除去树脂,得到滤液;(7)分离卵转铁蛋白:向步骤(6)中滤液加入PEG8000至PEG8000终浓度为10%~20%,使用NaOH溶液调节pH,离心取沉淀;(8)二次超滤:使用水溶解步骤(7)中的沉淀,进行超滤,不断加水进行浓缩,除去PEG8000,从而获得浓缩后的卵转铁蛋白。(9)真空冷冻干燥:将浓缩后的卵转铁蛋白溶液冷冻干燥得到卵转铁蛋白产品。
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权利要求:
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