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一种提高肝素3-O-磺基转移酶1催化活性的方法 

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申请/专利权人:北京化工大学

摘要:本发明公开了一种提高肝素3‑O‑磺基转移酶1催化活性的方法,属于生物工程技术领域。本发明公开的一种提高肝素3‑O‑磺基转移酶1催化活性的方法,首先选用大肠杆菌作为宿主菌,然后利用N端融合促溶标签的方法对3‑O‑磺基转移酶1进行表达优化,将优化后的3‑O‑磺基转移酶1序列进一步通过理性设计突变改造,得到高活性的生产菌株。该酶的修饰对肝素的抗凝血活性有着至关重要的作用,该酶活性的提高对肝素的酶法合成速率及抗凝血活性都有正向的意义。

主权项:1.一种肝素3-O-磺基转移酶1突变体,其特征在于,在肝素3-O-磺基转移酶1的N端融合促溶标签MBP,然后通过分子改造获得肝素3-O-磺基转移酶1突变体;所述分子改造包括1-3中的任意一种:1将肝素3-O-磺基转移酶1的59位氨基酸由色氨酸突变为精氨酸;2将肝素3-O-磺基转移酶1的131位氨基酸由组氨酸突变为精氨酸;3将肝素3-O-磺基转移酶1的59位氨基酸由色氨酸突变为精氨酸,且131位氨基酸由组氨酸突变为精氨酸;所述肝素3-O-磺基转移酶1的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示;所述MBP的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 北京化工大学 一种提高肝素3-O-磺基转移酶1催化活性的方法

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