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用于呼吸道细菌靶标核酸多联检的荧光PCR多重检测体系、试剂盒及检测方法 

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申请/专利权人:上海美吉生物医药科技有限公司

摘要:本发明公开了一种用于呼吸道细菌靶标核酸多联检的荧光PCR多重检测体系,所述荧光PCR多重检测体系包括多个探针和多个引物组,进行荧光探针扩增检测和荧光引物熔解曲线分析检测,实现单个通道中多种靶标检测分析。所述荧光探针扩增检测体系和荧光引物熔解曲线分析检测体系所包含的引物探针组中的上、下游引物和探针的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1~22所示。本发明还公开了一种试剂、试剂盒或产品,包含上述的荧光PCR多重检测体系。本发明还公开了上述荧光PCR多重检测体系、试剂试剂盒产品在呼吸道细菌靶标核酸多联检中的应用,以及一种用于呼吸道细菌靶标核酸多联检的检测方法。

主权项:1.一种用于呼吸道细菌靶标核酸多联检的荧光PCR多重检测试剂盒,其特征在于,所述荧光PCR多重检测试剂盒包括多个探针和多个引物组,进行荧光PCR多重检测,所述荧光PCR多重检测包括荧光探针扩增检测和荧光引物熔解曲线分析检测,实现单个通道中多种靶标检测分析;所述荧光PCR多重检测试剂盒包括荧光PCR多重检测体系,所述荧光PCR多重检测体系包括荧光探针扩增检测体系和荧光引物熔解曲线分析检测体系;所述引物长度为18-25bp,GC含量为40-70%,所述引物的Tm值为55-60℃;所述探针长度为25-40bp,所述探针的Tm比所述引物Tm值高5-10℃;所述荧光探针扩增检测体系中,所述探针的序列包括SEQIDNO.3、SEQIDNO.6、SEQIDNO.9、SEQIDNO.12;所述引物的序列包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.4、SEQIDNO.5、SEQIDNO.7、SEQIDNO.8、SEQIDNO.10、SEQIDNO.11;在所述荧光探针扩增检测的变性阶段采集荧光;所述荧光引物熔解曲线分析检测体系中,所述引物的序列包括SEQIDNO.13、SEQIDNO.14、SEQIDNO.15、SEQIDNO.16、SEQIDNO.17、SEQIDNO.18、SEQIDNO.19、SEQIDNO.20;所述荧光引物熔解曲线分析检测体系中对上游引物或下游引物的序列进行基团修饰,其中5’端标记荧光淬灭基团,在靠近3’端的T碱基标记荧光报告基团;所述荧光报告基团和所述荧光淬灭基团之间的间距为15-25nt。

全文数据:

权利要求:

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