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申请/专利权人：山东省动物疫病预防与控制中心(山东省人畜共患病流调监测中心)
摘要：本申请涉及定量PCR领域，提出了一种检测牛布鲁氏菌、分枝杆菌的双重荧光定量PCR方法，包括：确定引物探针序列；基于引物探针序列构建双重荧光定量PCR反应体系，并进行PCR扩增；基于模版梯度稀释过程中多种因素优化过程中Ct值的变化情况确定协同影响系数；基于梯度稀释后荧光定量PCR反应过程中因素之间的协同影响作用确定协同波动权重；分别基于牛布鲁氏菌OMP25基因以及分枝杆菌Mpt83基因构建质粒；基于协同波动权重确定质粒梯度稀释后荧光定量PCR反应过程中反应效率校正结果；分别对质粒梯度稀释结果进行灵敏性检测、重复性检测。本申请通过对模版标准曲线的校正，提高PCR数据的准确度。
主权项：1.一种检测牛布鲁氏菌、分枝杆菌的双重荧光定量PCR方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：分别确定针对牛布鲁氏菌OMP25基因以及分枝杆菌Mpt83基因的引物探针序列；基于所述引物探针序列构建双重荧光定量PCR反应体系，并进行PCR扩增；基于牛布鲁氏菌OMP25基因以及分枝杆菌Mpt83基因所形成模版梯度稀释过程中多种因素优化过程中Ct值的变化情况确定每个浓度下每种因素的协同影响系数；基于梯度稀释后荧光定量PCR反应过程中因素之间的协同影响作用确定每种因素影响反应效率的协同波动权重；分别基于牛布鲁氏菌OMP25基因以及分枝杆菌Mpt83基因构建质粒；基于所有种因素影响反应效率的协同波动权重确定质粒梯度稀释后荧光定量PCR反应过程中反应效率校正结果；分别对质粒梯度稀释结果进行灵敏性检测、重复性检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 山东省动物疫病预防与控制中心(山东省人畜共患病流调监测中心) 一种检测牛布鲁氏菌、分枝杆菌的双重荧光定量PCR方法
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