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申请/专利权人：江苏大学

摘要：本发明属于生物传感检测领域，涉及一种基于共振能量转移策略的双电位比率电化学发光适配体传感器制备方法及其应用。具体将AuNCs溶液、Apt溶液、MCH溶液、cDNA溶液和PTC‑NH2溶液依次修饰到处理后的玻碳电极表面，得到传感器；其中，AuNCs作为阳极电化学发光信号，PTC‑NH2作为阴极电化学发光信号；其中PTC‑NH2既可作为一种发光剂，同时是一种良好的猝灭剂，会与AuNCs发生电化学发光共振能量转移作用，所构建的传感器分析性能优异，检测线性范围宽0.05pM～10nM且检出限低0.05pM，兼具灵敏度高、选择性好、可靠性好的优点，并用于Pb2+的检测。

主权项：1.一种基于共振能量转移策略的双电位比率电化学发光适配体传感器制备方法,其特征在于，包括以下步骤：1AuNCs的制备：首先，称取氢氧化钠和6-氮杂-2硫代胸腺嘧混合后用超纯水A溶解，得到含NaOH的ATT溶液；然后称取氯金酸并用超纯水B溶解，得到HAuCl4溶液；将含NaOH的ATT溶液倒入HAuCl4溶液中，混合均匀后置于黑暗中反应得到黄色溶液；然后将黄色溶液倒入透析袋中透析，最后将透析后的溶液放入真空冷冻机内干燥，干燥后的粉末状固体即为AuNCs；2PTC-NH2的制备：首先，将苝四甲酸二酐溶解在丙酮中，搅拌均匀，得到的红色混合溶液；然后，将乙二胺加入到上述红色混合溶液中，搅拌均匀，并置于一定温度条件下进行反应，反应后，再用无水乙醇进行离心洗涤，将离心洗涤后得到的沉淀进行干燥，得到的产品记为PTC-NH2；3将玻碳电极用三氧化二铝粉末打磨、抛光，然后依次在水、乙醇、丙酮和水中超声清洗并晾干，得到处理后的玻碳电极；然后将步骤1制备得到的粉末状AuNCs溶于超纯水中，得到AuNCs溶液；AuNCs溶液修饰到处理后的玻碳电极表面，室温下晾干，得到的产品标记为AuNCsGCE；4将Pb2+适配体溶液修饰于步骤3得到的AuNCsGCE表面，在一定温度条件下孵育一段时间后用超纯水淋洗，得到的产品标记为AptAuNCsGCE；5将6-巯基己醇溶液修饰于步骤4得到的AptAuNCsGCE表面，在室温条件下反应，再用超纯水淋洗，得到的产品标记为MCHAptAuNCsGCE；6将Pb2+适配体的互补DNA溶液修饰于步骤5得到的MCHAptAuNCsGCE表面，在一定温度条件下反应一段时间，用超纯水淋洗，得到的产品标记为cDNAMCHAptAuNCsGCE；7将步骤2制备得到的PTC-NH2溶解在超纯水中，得到PTC-NH2溶液；再将PTC-NH2溶液修饰于步骤6得到的cDNAMCHAptAuNCsGCE表面，在室温下反应一段时间后用超纯水淋洗，得到的产品标记为PTC-NH2cDNAMCHAptAuNCsGCE，即为基于共振能量转移策略的双电位比率电化学发光适配体传感器。

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