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申请/专利权人:生态环境部华南环境科学研究所(生态环境部生态环境应急研究所)
摘要:本发明公开了基于卵清蛋白‑金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,属于喹诺酮类药物荧光检测方法技术领域,采样一步高温油浴法合成氟喹诺酮类药物具有荧光增敏作用的卵清蛋白‑金纳米簇,探针合成方法简便、步骤少、绿色合成、无需添加还原剂,合成时间合理,其减弱的荧光信号强度与氟喹诺酮类药物诺氟沙星的浓度呈一定线性关系,据此建立了检测诺氟沙星的荧光检测方法,该检测方法响应过程简单,检测体系中无需经过多种中间元素传递信号,利用卵清蛋白可以直接与诺氟沙星特异结合的优势,这种直接检测的方式可以有效规避检测体系组成过多、响应机制复杂、信号转换次数多、检测不灵敏抗干扰性弱不足。
主权项:1.基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:包括如下步骤:步骤一:将卵清蛋白与离子水采用1g:25ml进行溶解混合;步骤二:向步骤一中离子水内加入0.8gL硼氢化钠在20-30℃温度下搅拌1h;步骤三:搅拌完成后放置在加热器内保持70℃;步骤四:加热至没有气泡产生后恢复至室温,并加入9ml、24.3mMHAuCl4并搅拌2min;步骤五:加入4ml1M氢氧化钠,在高温油浴下反应3h;步骤六:用0.45μm滤头过滤大颗粒金,10kDa超滤管超滤13min后得到浅白色溶液,即得到卵清蛋白-金纳米簇,避光保存于4℃下,备用;在步骤六中卵清蛋白-金纳米簇100μL与不同浓度的诺氟沙星混合;加入1.0molLtris-HCl缓冲溶液得到混合溶液,在一定温度下进行孵育;测定含有不同浓度诺氟沙星的卵清蛋白-金纳米簇在521nm激发波长下的荧光强度,计为F,计算荧光强度变化率(F-F0)F0的值;以诺氟沙星浓度为横坐标,荧光强度变化率(F-F0)F0为纵坐标,绘制标准曲线图,获得最低检测限;空白卵清蛋白-金纳米簇溶液的荧光强度计为F0。
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权利要求:
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