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申请/专利权人：深圳大学
摘要：本发明涉及生物检测领域，特别涉及一种基于CRISPRCas13a系统的侧流生物传感器及其制备方法和应用。所述侧流生物传感器，包括：CRISPRCas13a反应体系和试纸条；CRISPRCas13a反应体系包括Cas13a蛋白、crRNA、报告探针；试纸条包括底板以及在所述底板上依次搭接的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；其中，结合垫上固定有金纳米探针；硝酸纤维素膜上包括固定有链霉亲和素的质控线、固定有捕获DNA的检测线。当miR‑21存在时，miR‑21与crRNA互补配对，激活Cas13a蛋白对报告探针进行切割得到切割产物，切割产物与金纳米探针结合，再与捕获DNA互补配对，从而在检测线上产生可视信号和拉曼信号。该侧流生物传感器能够实现从“无”到“有”的信号响应，且具有较高的灵敏度，检测限可达aM级别。
主权项：1.一种基于CRISPRCas13a系统的侧流生物传感器，其特征在于，包括：CRISPRCas13a反应体系和试纸条；所述CRISPRCas13a反应体系包括Cas13a蛋白、crRNA、报告探针；其中，所述报告探针为DNA-RNA拼接结构，包括连接DNA和连接RNA，所述连接DNA的5’末端修饰有荧光分子，所述连接RNA的3’末端修饰有生物素；所述试纸条包括底板以及在所述底板上依次搭接的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；其中，所述结合垫上固定有金纳米探针，所述金纳米探针包括金纳米颗粒以及修饰在所述金纳米颗粒上的拉曼报告分子和抗荧光分子抗体；所述硝酸纤维素膜上包括固定有链霉亲和素的质控线、固定有捕获DNA的检测线；所述crRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述报告探针的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述捕获DNA的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。
全文数据：
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百度查询： 深圳大学 一种基于CRISPR/Cas13a系统的侧流生物传感器及其制备方法与应用
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