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申请/专利权人：岭南师范学院

摘要：本发明提供一种道地南药石牌广藿香高效扩繁体系建立方法，涉及广藿香良种高效扩繁技术领域。该道地南药石牌广藿香高效扩繁体系建立方法技术，具体包括以下方法：S1.母株选取，S2.前期准备，S3.培养基的配制和灭菌，S4.外植体的消毒，S5.叶片丛生芽诱导和增殖培养，S6.生根壮苗诱导培养，S7.培养条件，S8.组培苗的炼苗和移。本发明提供一种道地南药石牌广藿香高效扩繁体系建立方法，选用石牌广藿香生长状况良好、无病虫害的嫩叶作为组织培养的外植体有利于芽的形成与存活，从而解决组培苗玻璃化、褐化、生根慢的问题，得到石牌广藿香从生芽诱导和增殖的最佳培养配方为MS+30gL蔗糖+0.1mgL6‑BA+0.1mgLNAA+7gL琼脂，pH5.8~6.0，生根培养基为MS基本培养基，可不添加植物生长调剂。

主权项：1.一种道地南药石牌广藿香高效扩繁体系建立方法，包括以下方法：S1.母株选取选取扦插种植于光照培养箱的植株为母本，剪取生长状态良好且无病害幼嫩叶片为外植体；S2.前期准备进行组培实验前，需要提前准备好相应的试剂和仪器；S3.培养基的配制和灭菌石牌广藿香高效扩繁体系采用MS培养基，按照MS+30gL蔗糖+0.1mgL6-BA+0.1mgLNAA+7gL琼脂的配方配制，配制过程为：取1L容量瓶，分别加入MS，根据实验设置的培养基添加植物激素，加入蔗糖30g，用玻璃棒搅拌，蔗糖充分溶解后添加蒸馏水定容至1L，将MS培养基酸碱度调至pH5.8~6.0；S4.外植体的消毒剪取光照培养箱中广藿香嫩叶，置于烧杯中用洗洁精溶液浸泡5min左右，后用流水冲洗40min后，转至超净工作台内进行外植体消毒处理：采用75%乙醇溶液处理30s，之后用无菌水清洗1遍，然后用百分之二的次氯酸钠溶液消毒5min，后用无菌水清洗5遍，切成5mm×5mm大小的叶盘，放置在经高温灭菌处理后的碟子上备用；S5.叶片丛生芽诱导和增殖培养以MS为基本培养基，广藿香嫩叶为外植体进行诱芽培养，广藿香叶片丛生芽诱导和增殖培养基为：MS+30gL蔗糖+0.1mgL6-BA+0.1mgLNAA+7gL琼脂，pH5.8~6.0，每2~3周继代一次，培养30d左右芽苗长至1-2cm；S6.生根壮苗诱导培养将增殖培养获得的生长状态良好，高约5cm的广藿香健壮幼苗接种至生根培养基中进行培养，生根培养基为MS基本培养基，可不添加植物生长调剂，接种7d后生根；S7.培养条件本实验各个阶段的石牌广藿香组培苗均置于25℃恒温培养箱中进行培养并每天光照12小时；S8.组培苗的炼苗和移选择生根健壮的广藿香组培苗，经过炼苗后，将组培苗从培养瓶中取出，移栽到装有适宜湿度基质的营养钵中，移栽选用泥炭土和蛭石等比例混合的基质中，移栽后置于温室内进行常规管理，1个月后可移栽到大田进行田间管理。

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