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申请/专利权人：DNA斯克瑞普特公司
摘要：本发明涉及使用多A和多U聚合酶从3’‑O‑可逆封闭的核苷三磷酸无模板酶促合成具有预定序列的多核糖核苷酸的方法和组合物。
主权项：1.一种合成具有预定序列的多核苷酸的方法，所述方法包括以下步骤：a提供3’-末端核苷酸具有游离3’-羟基的起始子；以及b重复以下的循环直至形成所述多核苷酸：i在延长条件下使具有游离3’-羟基的所述起始子或延长片段与3’-O-封闭的核苷三磷酸和无模板聚合酶接触，使得所述起始子或延长片段通过3’-O-封闭的-核苷三磷酸的掺入被延长以形成3’-O-封闭的-延长片段，和ii使所述延长片段去封闭以形成具有游离3’-羟基的延长片段；其中所述无模板聚合酶是具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的野生型多A聚合酶PAP的PAP变体，其包含取代V240A、M318T和A410V；以及其中所述PAP变体相比具有SEQIDNO:3的野生型PAP能够更有效地掺入AM-rGTP和AM-rCTP单体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： DNA斯克瑞普特公司 使用多(A)和多(U)聚合酶无模板酶促合成多核苷酸
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