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申请/专利权人：浙江大学医学院附属第二医院
摘要：本发明涉及鼻上皮干细胞技术领域，具体地，涉及一种鼻上皮干细胞的制备方法。其中所述鼻上皮干细胞的获取方法如下：1.1用1％利多卡因、呋麻滴鼻液混合液浸润中鼻甲或者下鼻甲的鼻黏膜表面；1.2鼻刷平行紧贴浸润后的鼻黏膜表面滚动刷取鼻上皮细胞；1.3将鼻刷浸泡入预冷的细胞培养基使鼻上皮细胞脱落于细胞培养基中；1.4含细胞培养基离心，得细胞沉淀；1.5消化、分散细胞沉淀：消化酶‑细胞培养基混合液重悬所得细胞沉淀，在37℃恒温水浴锅消化；然后用中和液中和，离心，得细胞沉淀；1.6用预冷细胞培养液重悬所得细胞沉淀，70um过滤器过滤细胞悬液，获取含鼻上皮干细胞细胞滤液。
主权项：1.一种鼻上皮干细胞的制备方法，其特征在于，所述鼻上皮干细胞无创获取，其获取方法如下：1.1用鼻喷、棉片或棉签蘸取含1％利多卡因与呋麻的混合液，浸润鼻腔鼻黏膜表面；1.2在鼻内窥镜系统辅助下，用鼻刷平行紧贴药物浸润后的鼻黏膜表面，滚动所述鼻刷刷取鼻上皮细胞；1.3将步骤1.2中刷取了鼻上皮细胞的鼻刷浸泡入预冷的细胞培养基，涮动鼻刷使鼻上皮细胞脱落于细胞培养基中；1.4离心步骤1.3所得含有细胞的细胞培养基，分离上清液及细胞沉淀；1.5消化细胞沉淀：用分散酶重悬步骤1.4所得细胞沉淀，在37℃恒温水浴锅消化；然后用中和液中和分散酶，离心，分离上清液及细胞沉淀；用胰酶溶液重悬细胞沉淀，分散均匀，水浴37°孵育，加入中和液中和；再次离心，分离上清液和细胞沉淀；1.6用预冷DMEM培养液重悬1.5最后所得细胞沉淀，分散均匀，用70um过滤器过滤，获取细胞滤液。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江大学医学院附属第二医院 一种鼻上皮干细胞的制备方法
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