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申请/专利权人:北京和益源生物技术有限公司
摘要:本发明属于微生物和基因工程技术领域,提供了一种基于双乙酰还原酶筛选高产香唾液链球菌嗜热亚种的方法,所述方法以基因butA高表达定向筛选高产香的唾液链球菌嗜热亚种,并进一步对高表达基因butA的菌株进行产丁二酮检测,从而验证唾液链球菌嗜热亚种的产香能力。本发明的筛选方法可以定向筛选高产香的唾液链球菌嗜热亚种,具备高效和特异性筛选的特点,避免了传统筛选方法中单一性和非特异性筛选的缺陷。
主权项:1.一种基于双乙酰还原酶筛选高产香唾液链球菌嗜热亚种的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)采用待测唾液链球菌嗜热亚种制备发酵乳;(2)在发酵乳中提取唾液链球菌嗜热亚种的总RNA、反转录合成cDNA,并以cDNA为模板,扩增双乙酰还原酶编码基因butA,检测基因butA的表达量;其中,所述基因butA的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示;以but-FR为引物,引物but-FR的序列如SEQIDNO:2和SEQIDNO:3所示;(3)以基因butA高表达定向筛选高产香的唾液链球菌嗜热亚种;(4)对高表达基因butA的菌株进行产丁二酮检测,从而验证唾液链球菌嗜热亚种的产香能力。
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