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基于自模板引物诱导的等温扩增制备DNA水凝胶的方法及应用 

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申请/专利权人:川北医学院

摘要:本发明公开了一种基于自模板引物诱导的等温扩增制备DNA水凝胶的方法及应用,该方法包含:将自模板引物或者含有自模板引物的DNA自组装模块于扩增缓冲液中进行等温扩增,将扩增产物透析除盐,冷冻干燥成干粉,冷冻保存,根据使用需要添加适当的缓冲液复溶DNA干粉,即可制备微观结构为线性或者网状的DNA水凝胶。本发明的方法能够无需模板,仅需一条引物即可实现DNA的生物合成,能够高效快速地合成DNA长链,避免了传统化学合成DNA的高成本、高污染和高毒性问题,而且将自模板引物嵌入DNA自组装模块上制备的载药功能型DNA水凝胶能够用于促进成骨细胞分化。

主权项:1.一种基于自模板引物诱导的等温扩增制备DNA水凝胶的方法,其特征在于,该方法包含:将自模板引物或者含有自模板引物的DNA自组装模块于扩增缓冲液中进行等温扩增,将扩增产物采用截留分子量为3000~4000的透析袋透析除盐,冷冻干燥成干粉,冷冻保存,根据使用需要添加适当的缓冲液复溶DNA干粉,获得线性或者网状的DNA水凝胶;其中,所述含有自模板引物的DNA自组装模块为DNA自组装模块的3’末端连接有自模板引物;所述自模板引物为连续重复的碱基序列或回文序列,所述连续重复的碱基序列的重复次数为5次以上;若采用自模板引物进行等温扩增,所述等温扩增的温度在60~70℃,所述等温扩增的时间在15min以上;若采用含有自模板引物的DNA自组装模块进行等温扩增,所述等温扩增的温度在35~40℃,所述等温扩增的时间在2h以上。

全文数据:

权利要求:

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