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申请/专利权人:东营天东制药有限公司
摘要:本发明涉及糜蛋白酶制备技术领域,提出了一种利用复合阴离子层析法制备猪源高纯度糜蛋白酶的工艺,包括以下步骤:S1、提取:获取猪胰脏进行搅碎处理;S2、酸浸:对搅碎的胰脏使用硫酸进行酸浸;S3、过滤澄清:对S2形成的溶液进行离心过滤,再使用硅藻土助滤器进行澄清:S4、盐析:在S3形成的溶液加入硫酸铵,收集硫酸铵饱和度析出物;S5、溶解活化:在S4形成的析出物中加入磷酸盐缓冲溶液,调节pH值;S6、稀释:使用磷酸盐缓冲液稀释S5中形成的溶液;S7、前平衡;S8、上样;S9、后平衡;S10、洗杂;S11、洗脱收集。通过上述技术方案,解决了相关技术中提取成本较高且制作效果较差的问题。
主权项:1.一种利用复合阴离子层析法制备猪源高纯度糜蛋白酶的工艺,其特征在于,包括以下步骤:S1、提取:获取猪胰脏进行搅碎处理;S2、酸浸:对搅碎的胰脏使用硫酸进行酸浸;S3、过滤澄清:对所述S2形成的溶液进行离心过滤,再使用硅藻土助滤器进行澄清:S4、盐析:在所述S3形成的溶液加入硫酸铵,收集硫酸铵饱和度析出物;S5、溶解活化:在所述S4形成的析出物中加入磷酸烟缓冲溶液,调节pH值;S6、稀释:使用磷酸盐缓冲液稀释所述S5中形成的溶液;S7、前平衡:使用磷酸盐缓冲液平衡层析柱;S8、上样:将S6稀释后的溶液流过层析柱;S9、后平衡:使用磷酸盐缓冲液平衡盐析柱;S10、洗杂:先使用磷酸盐缓冲液洗杂,再利用醋酸缓冲液冲洗;S11、洗脱收集:使用醋酸缓冲液洗脱收集目标蛋白。
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