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申请/专利权人：祝志波
摘要：本发明公开了一种哺乳动物的血管外膜细胞培养方法，涉及细胞培养技术领域，包括：通过袖套法获取管状的血管外膜；将血管外膜剪成块状，获得多块血管外膜组织块，血管外膜组织块中含有成纤维细胞；通过组织贴壁法，对血管外膜组织块中的成纤维细胞进行原代培养，得到生成的成纤维细胞。本申请实施例采用袖套法获取血管外膜，步骤简单，用时短，降低了血管外膜中成纤维细胞的污染，采用组织贴壁法进行原代培养，在很大程度上保持了其原有组织结构，由于没有经过酶处理，其更接近生理状况下的细胞生长，有利于其适应体外培养环境。
主权项：1.一种哺乳动物的血管外膜细胞培养方法，其特征在于，包括：通过袖套法获取管状的血管外膜，包括：取主动脉置于无菌培养皿中用磷酸盐缓冲溶液冲洗血管后，不进行血管剖开操作，直接左手持眼科弯镊固定血管一端，右手持另一眼科镊子自上而下剥离血管外膜放入新的培养皿中即可；将所述血管外膜剪成块状，获得多块体积范围为2mm³～3mm³的血管外膜组织块，所述血管外膜组织块中含有成纤维细胞；通过组织贴壁法，对所述血管外膜组织块中的成纤维细胞进行原代培养，包括：将所述血管外膜组织块平铺贴附于容器的器壁上，放入培养箱进行原代培养；对所述血管外膜组织块多次重复以下步骤进行原代培养：当所述血管外膜组织块上生成的成纤维细胞达到预设密度时，从所述血管外膜组织块上剥离生成的成纤维细胞，得到生成的成纤维细胞，将剥离后的所述血管外膜组织块通过组织贴壁法继续进行原代培养；所述成纤维细胞的萌出时间为24h，所述预设密度的范围为80％～90％；还包括：在对所述血管外膜组织块重复进行原代培养的过程中，当所述血管外膜组织块从容器的器壁上脱落，则对所述血管外膜组织块重新贴壁，并进行原代培养。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 祝志波 一种哺乳动物的血管外膜细胞培养方法
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