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一种肺肝癌预转移龛体外实验体系的建立方法 

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申请/专利权人:复旦大学附属中山医院

摘要:本发明属于生物工程领域,提供了一种肝癌肺预转移龛体外实验体系的建立方法,实验体系以非接触共培养的方式,在Millicell小室下室先将骨髓细胞诱导分化成MDSCs,同时在Millicell小室上室预包被肺硬度基底培养肺成纤维细胞,并以高硬度基底生长肝癌细胞分泌外泌体处理上室的肺成纤维细胞,从而巧妙地实现肺预转移龛内肺成纤维细胞与募集分化免疫抑制细胞共培养,较好地模拟再现了生物力学信号诱导下的肺预转移龛微环境中肺成纤维细胞的真实病理生长状态,为从生物力学角度认识原发瘤对远端预转移龛的调控,探索肝癌肺预转移龛新特征,以及龛内固有定植细胞与募集分化免疫抑制细胞相互作用机制提供了一种较理想的新型实验研究平台。

主权项:1.一种肝癌肺预转移龛体外实验体系的建立方法,其特征在于,包括如下步骤:1将分离纯化BMCs置于Millicell小室下室,使其诱导分化48h成MDSCs;2在Millicell小室上室预包被肺硬度基底培养肺成纤维细胞;3分离纯化获得低、高硬度基底生长肝癌细胞条件培养上清中外泌体LH-Exo;4LH-Exo处理上室肺硬度基底表面生长的肺成纤维细胞,同时与下室诱导分化的MDSCs共培养48h,模拟肺预转移龛内固有定植肺成纤维细胞的病理生长环境,得到肝癌肺预转移龛体外共培养实验体系。

全文数据:

权利要求:

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