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摘要：本发明属于蛋白晶体培养技术领域，具体涉及一种WRN蛋白解旋酶结构域结晶的方法。本发明通过昆虫细胞表达体系重组表达WRN解旋酶蛋白，通过一系列亲和层析纯化方法对目的蛋白进行分离和纯化；获得性质均一的目的蛋白后，加入小分子和金属离子进行孵育，形成蛋白‑小分子‑金属离子复合物；后续使用基于气相扩散原理的结晶方法结合点样机器人进行蛋白复合物单晶培养，共进行1000种以上的不同结晶条件筛选，最后筛选出蛋白复合物晶体的结晶条件。利用拍照系统观察蛋白质晶体的形貌，衍射优化后蛋白晶体，获取衍射数据并解析其晶体结构。本发明设置的WRN蛋白解旋酶结构域和小分子金属离子组合可以稳定重复出高质量的蛋白晶体，且晶体的分辨率高，可以达到1.9Å。
主权项：1.一种WRN蛋白解旋酶结构域结晶的方法，其特征在于：该方法包括制备步骤：1）WRN蛋白片段的设计和改造；2）WRN_517-945蛋白表达和纯化；3）WRN_517-945蛋白晶体培养；4）WRN_517-945结构解析；所述的WRN蛋白片段的设计和改造，具体是将已解析的结构WRN_517-1093进行截断，留下核心的解旋酶结构域WRN_517-945。
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百度查询： 苏州青云瑞晶生物科技有限公司 一种WRN蛋白解旋酶结构域结晶的方法
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