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一种基于m6A结合蛋白YTHDF2的脑缺血灌注模型 

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申请/专利权人:深圳市盐田区人民医院

摘要:本发明涉及脑缺血灌注模型技术领域,提供了一种基于m6A结合蛋白YTHDF2的脑缺血灌注模型,首先,通过颈外动脉栓线法在小鼠中构建大脑中动脉闭塞模型;随后,利用转录激活因子样效应物核酸酶技术敲除小鼠中的YTHDF2基因,并通过腺相关病毒载体介导的方法过表达YTHDF2基因;最后,采用免疫组织化学、实时荧光定量反转录聚合酶链反应和西方印迹技术,检测脑组织中YTHDF2及其下游靶基因的表达变化。此外,本发明还包括对小鼠进行行为学测试,构建行为表现评估模型以评估小鼠的行为能力。

主权项:1.一种基于m6A结合蛋白YTHDF2的脑缺血灌注模型,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,采用颈外动脉栓线法构建小鼠大脑中动脉闭塞模型;步骤二,使用转录激活因子样效应物核酸酶基因编辑技术构建YTHDF2敲除小鼠;步骤三,使用腺相关病毒载体介导小鼠YTHDF2基因过表达;步骤四,采用免疫组织化学、实时荧光定量反转录聚合酶链反应和西方印迹技术检测小鼠脑组织中YTHDF2及其下游靶基因的表达变化;步骤五,对小鼠进行行为学测试,构建行为表现评估模型,评估小鼠的行为能力,得到行为表现评估值,其中,行为表现评估模型的公式为: 式中,MI为行为表现评估值,MC为运动协调性评估值,MS为肌肉力量评估值,BA为平衡能力评估值,SR为抗压能力评估值。

全文数据:

权利要求:

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