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申请/专利权人：西北民族大学

摘要：本发明属于化学应用技术领域，特别涉及亲油疏水高活性负载微生物复合纤维素丝瓜络气凝胶的制备方法与应用，包括如下步骤：菌悬液的培养、丝瓜络纤维素LS的提取、HECLS复合气凝胶材料的制备、负载微生物Bn‑HECLS气凝胶的制备、油疏水高活性负载微生物Bn‑HECLS气凝胶的制备。本发明采用粘连剂多次浓缩负载微生物和选择性吸附疏水改性对提高此材料的降解率起着关键性作用，并且材料本身具有的吸附性能利于增强其与柴油的接触率，通过对其应用的研究，初步认为本发明中制备的这类亲油疏水高活性负载微生物复合纤维素丝瓜络气凝胶具有较好的降解正构烷烃活性，并且对周围劣势环境呈现出较强的耐受能力，具有一定的实际应用价值。

主权项：1.亲油疏水高活性负载微生物复合纤维素丝瓜络气凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、菌悬液的培养芽孢杆菌BTS、假单胞菌PA、不动杆菌AL、类诺卡氏菌NL和青霉菌PO是筛选出的对石油烃类具有降解作用的菌；将100μL活性菌株接种于无菌营养肉汤培养基中，在37℃、120rmin-1条件下振荡培养；48h后观察浊度，菌落数达到1×108cfumL-1以上；按相同体积比配制混合微生物液，取出保存在4℃冰箱中；步骤二、丝瓜络纤维素（LS）的提取首先，将干燥的20g丝瓜络（命名为SPLS）粉碎，使用80目筛子筛分，得到预处理丝瓜纤维（命名为PLS）；其次，将PLS在98°C下用30ml5wt%NaOH水解连续搅拌4h，PLS:NaOH的浴比1:20；然后，在H2SO4中浸泡10min，PLS:H2SO4的浴比1:20，过滤洗涤至中性；最后，通过在50°C下恒温干燥获得丝瓜纤维素，命名为LS；步骤三、HECLS复合气凝胶材料的制备首先，将10g的丝瓜纤维素（LS）溶解于30g5wt%NaOH溶液中后加入60g去离子水中溶解；然后，将4ｇ纤维素（命名为HEC）粉末加入96ｇ的去离子水中，静置0.5h，然后进行反复搅拌、静置，直至其完全溶解于去离子水中，获得4%的HEC溶液；其次，将上述质量分数为4%的HEC溶液和10%的LS溶液按照1：1共混，加入交联剂乙二醇二缩水甘油醚EDGE，EDGE用量为混合物中HEC和LS干重的50%，在80℃下混合0.5h，得到HECLS共混物；最后，在冷冻干燥机中冷冻干燥HECLS混合物48小时，再重复去离子水冲洗去除复合材料之中的氢氧化钠，然后再放入-20℃冰箱24h，最后经冷冻干燥即可获得复合纤维素丝瓜络气凝胶，命名为HECLS；步骤四、负载微生物Bn-HECLS气凝胶的制备将步骤三得到的HECLS气凝胶在121°C高压灭菌器中灭菌30分钟，备用；HECLS气凝胶固定化微生物分为三个步骤：首先，使HECLS完全吸附3%PVA溶液，多余的PVA通过过滤去除，防止气凝胶内部孔隙堵塞；其次，将HECLS浸入步骤一得到的混合微生物悬浮液中，直至吸附达到饱和，在30℃下干燥1小时，所述混合微生物悬浮液中BTS:NL:PO:PA:AL的混合比例1:1:1:1:1，重复该步骤多次，直到吸附达到饱和；最后，用CaNO32溶液在0-4℃下进行交联反应30min，在30℃下干燥1h，再抽滤出多余的CaNO32溶液；如此重复操作5次，第1、2、3、4、5次负载微生物后的载体分别命名为B1-HECLS、B2-HECLS、B3-HECLS，B4-HECLS、B5-HECLS；步骤五、亲油疏水高活性负载微生物Bn-HECLS气凝胶的制备取步骤四中负载5次的石油烃降解菌的材料（B5-HECLS）为后续亲油疏水改性材料；首先，将聚偏氟乙烯PVDF加入N，N二甲基甲酰胺DMF溶液中，常温搅拌1h使其充分混合；然后，将B5-HECLS海绵快速浸入到上述混合溶液中；最后，将浸入混合溶液的材料快速取出并放入蒸馏水中，在表面形成疏水涂层，将所得疏水亲油改性材料命名为OB5-HECLS气凝胶。

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百度查询： 西北民族大学 亲油疏水高活性负载微生物复合纤维素/丝瓜络气凝胶的制备方法与应用