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一种基于G-四联体的双模式卡那霉素适配体传感器的制备方法 

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申请/专利权人:山东理工大学

摘要:本发明属于生物传感器技术领域,公开了一种可检测牛奶中卡那霉素的双模式适配体传感器的制备及使用方法。本发明利用靶标和适配体的特异性结合释放游离的互补核酸链Pr,Pr与挂锁探针在DNA连接酶和聚合酶的作用下进行滚环扩增RCA产生大量G‑四联体。基于G‑四联体与血红素复合能够改变3,3',5,5'‑四甲基联苯胺显色效果,实现卡那霉素的视觉检测。基于G‑四联体与亚甲基蓝的强吸附作用,实现卡那霉素的电化学检测,同时在电极表面修饰多壁碳纳米管和金纳米颗粒,以增加电活性面积和电导率。本发明利用RCA不仅放大了比色视觉信号,还结合纳米复合材料实现了电化学信号的双重放大,实现了卡那霉素可视化和高灵敏的双模式检测。

主权项:1.一种基于G-四联体的双模式卡那霉素适配体传感器的制备方法,其特征在于:制备适配体与其互补核酸链形成的双链结构,利用靶标和适配体的特异性结合释放游离的互补核酸链,在挂锁探针、DNA酶及钾离子的作用下触发滚环扩增产生大量G-四联体,基于G-四联体与血红素复合物能够形成类似辣根过氧化物酶的功能和G-四联体对亚甲基蓝有强吸附作用,实现卡那霉素的可视化比色和高灵敏电化学的双模式检测;可视化比色检测的方法是:将G-四联体产物与血红素结合改变过氧化物酶活性,使TMB在H2O2存在下被氧化显色,通过TMB的颜色变化及吸光度的测定实现对卡那霉素的可视化检测;高灵敏电化学检测的方法是:在电极表面修饰多壁碳纳米管和纳米金颗粒,然后固定G-四联体产物,孵育亚甲基蓝,通过差分脉冲伏安法测量吸附在G-四联体上亚甲基蓝信号,当G-四联体随着目标物增加而增加时,电化学信号与吸附亚甲基蓝数量成正比,基于纳米材料和滚环扩增双信号放大实现对卡那霉素的高灵敏电化学检测。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山东理工大学 一种基于G-四联体的双模式卡那霉素适配体传感器的制备方法

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