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ELISA试剂盒及其制备方法和检测方法 

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申请/专利权人:伊莱瑞特(武汉)生物技术有限公司

摘要:本发明提供一种ELISA试剂盒及其制备方法和检测方法。该ELISA试剂盒以点击化学进行信号放大,是铜催化的叠氮炔烃环加成反应CuAAC,通过合成炔烃化链霉亲和素或叠氮化链霉亲和素作为检测生物素的探针,再加入点击化学反应底物叠氮化生物素或炔烃化生物素,增加检测抗体上生物素的数量,然后再和链霉亲和素标记的HRP结合,从而起到放大信号的效果,有效地提高了检测人IL‑6的实际样本的灵敏度。

主权项:1.一种ELISA试剂盒,其特征在于,包括能够进行点击反应的探针和底物,所述点击反应为采用铜离子催化探针、底物上叠氮基团与炔烃基团的点击反应;所述探针为叠氮化链霉亲和素或者炔烃化链霉亲和素,相应地,所述底物为炔烃化生物素或者叠氮化生物素;所述叠氮化链霉亲和素由链霉亲和素和叠氮化试剂反应制备而成,所述炔烃化链霉亲和素由链霉亲和素和炔烃化试剂反应制备而成;所述叠氮化试剂选自Azido-PEG4-NHS、6-AzidohexanoicAcidNHS、6-AzidohexanoicAcidSulfo-NHS中的至少一种,所述炔烃化试剂选自Alkyne-PEG4-NHS或者Propargyl-NHS;所述炔烃化生物素选自Biotin-PEG4-Alkyne或者PEG4carboxamide-PropargylBiotin;所述叠氮化生物素选自BiotinPicolylAzide、Biotin-PEG3-Azide、PEG4carboxamide-6-AzidohexanylBiotin中的至少一种;所述ELISA试剂盒还包括HRP标记的链霉亲和素、标记有生物素的检测抗体、铜离子催化剂、TMB显色液、包被物、封闭液和或终止液。

全文数据:

权利要求:

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